PCR技術可用于臨床的病原菌檢測。為檢測病人是否感染了某種病原菌,醫(yī)生進行了相關操作:①分析PCR擴增結(jié)果;②從病人組織樣本中提取DNA;③利用PCR擴增DNA片段;④采集病人組織樣本?;卮鹣铝袉栴}。
(1)PCR是 聚合酶鏈式反應聚合酶鏈式反應的縮寫。它是一項根據(jù) DNA半保留復制DNA半保留復制的原理,在生物體外大量快速擴增特定DNA片段的技術。PCR的產(chǎn)物常用 凝膠電泳凝膠電泳來鑒定。
(2)若要得到正確的檢測結(jié)果,正確的操作順序應該是 ④②③①④②③①(用數(shù)字序號表示)。
(3)操作③中使用的酶是 耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)。PCR反應中的每次循環(huán)可分為變性、復性、延伸延伸三步,其中復性的結(jié)果是 兩種引物分別與兩條單鏈DNA結(jié)合兩種引物分別與兩條單鏈DNA結(jié)合。
(4)為了作出正確的診斷,PCR反應所用的引物應該能與 病原菌DNA病原菌DNA特異性結(jié)合。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】聚合酶鏈式反應;DNA半保留復制;凝膠電泳;④②③①;耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶);延伸;兩種引物分別與兩條單鏈DNA結(jié)合;病原菌DNA
【解答】
【點評】
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限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識別序列及切割位點 T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
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