根據(jù)以下敘述回答有關(guān)的問(wèn)題：
基因敲除是針對(duì)某個(gè)序列已知但功能未知的基因，改變其基因結(jié)構(gòu)，令該基因功能喪失，從而對(duì)生物體造成影響，進(jìn)而推測(cè)出該基因功能的一門(mén)技術(shù)。以下是制備基因敲除小鼠的過(guò)程示意圖。
請(qǐng)回答：
（1）為了獲得目的基因，可以用 化學(xué)方法合成化學(xué)方法合成或者PCR擴(kuò)增法。構(gòu)建基因敲除載體時(shí)需要的工具酶有 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。
（2）為了得到胚胎干細(xì)胞，可以用 胰蛋白酶胰蛋白酶消化胚胎組織中的膠原纖維和細(xì)胞外的其他成分，獲得單個(gè)胚胎細(xì)胞懸浮液，然后進(jìn)行原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)。也可以直接將胚胎組織從機(jī)體中取出后立即進(jìn)行細(xì)胞、組織培養(yǎng)，當(dāng)細(xì)胞從組織塊中遷移出來(lái)，形成 生長(zhǎng)暈生長(zhǎng)暈并增大后，再傳代培養(yǎng)。
（3）將囊胚移植到代孕母鼠體內(nèi)后，其外表的一層扁平細(xì)胞，將來(lái)會(huì)發(fā)育為 胚胎附屬結(jié)構(gòu)或者胚外結(jié)構(gòu)胚胎附屬結(jié)構(gòu)或者胚外結(jié)構(gòu)。生產(chǎn)出的一只嵌合體小鼠與野生型小鼠雜交后（假設(shè)子代足夠多） 不一定不一定（一定、不一定）能得到雜合子基因敲除小鼠?；蚯贸夹g(shù)具有廣闊的應(yīng)用前景，請(qǐng)舉一例 為醫(yī)學(xué)研究提供材料；改造動(dòng)物基因型，鑒定新基因和/或其新功能，研究發(fā)育生物學(xué)；治療遺傳病，這包括去除多余基因或修飾改造原有異常基因以達(dá)到治療的目的；改造生物、培育新的生物品種為醫(yī)學(xué)研究提供材料；改造動(dòng)物基因型，鑒定新基因和/或其新功能，研究發(fā)育生物學(xué)；治療遺傳病，這包括去除多余基因或修飾改造原有異常基因以達(dá)到治療的目的；改造生物、培育新的生物品種。
【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．
【答案】化學(xué)方法合成；限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶；胰蛋白酶；生長(zhǎng)暈；胚胎附屬結(jié)構(gòu)或者胚外結(jié)構(gòu)；不一定；為醫(yī)學(xué)研究提供材料；改造動(dòng)物基因型，鑒定新基因和/或其新功能，研究發(fā)育生物學(xué)；治療遺傳病，這包括去除多余基因或修飾改造原有異常基因以達(dá)到治療的目的；改造生物、培育新的生物品種
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：80引用：3難度：0.3
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1．人類(lèi)基因組計(jì)劃測(cè)定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
2．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無(wú)義突變遺傳病的治療
無(wú)義突變是由于某個(gè)堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類(lèi)基因相關(guān)遺傳疾病是由無(wú)義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價(jià)值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過(guò)一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過(guò)高或過(guò)低表達(dá)，都可能會(huì)導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實(shí)現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來(lái)，它的反密碼子通過(guò)堿基配對(duì)原則可以識(shí)別無(wú)義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無(wú)義突變位點(diǎn)時(shí)不啟動(dòng)翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長(zhǎng)蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無(wú)義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對(duì)該無(wú)義突變?cè)O(shè)計(jì)的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識(shí)別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡(jiǎn)寫(xiě)作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實(shí)驗(yàn)顯示能夠降低黏多糖過(guò)度積存，實(shí)現(xiàn)對(duì)該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來(lái)看，G418在促進(jìn)跨越無(wú)義突變位點(diǎn)繼續(xù)翻譯時(shí)引入的氨基酸較為隨機(jī)，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會(huì)影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個(gè)體治療中具有很高的安全性，因而在未來(lái)基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時(shí)，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識(shí)別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補(bǔ)DNA鏈，再經(jīng)過(guò)過(guò)程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過(guò)檢測(cè)來(lái)確定是否跨越無(wú)義突變位點(diǎn)繼續(xù)向后翻譯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無(wú)義突變位點(diǎn)的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報(bào)道，已在近1000個(gè)不同的人類(lèi)基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個(gè)無(wú)義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計(jì)獨(dú)特的治療策略，這將是一項(xiàng)耗費(fèi)驚人的項(xiàng)目。據(jù)此說(shuō)明sup-tRNA的應(yīng)用價(jià)值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：26引用：1難度：0.6 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒(méi)有抗性的植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫(kù)的過(guò)程。
（1）圖示以mRNA為材料通過(guò)法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過(guò)這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致將其直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中不能復(fù)制和表達(dá)。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫(kù)中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來(lái)，構(gòu)建基因表達(dá)載體，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
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