鎳是一種重金屬，由于在工業(yè)上被大量使用及廢料的大量排放而對環(huán)境產(chǎn)生了嚴(yán)重的污染?？蒲腥藛T發(fā)現(xiàn)重組質(zhì)粒pSUNI含有nixA基因，該基因編碼一種高特異性的N+轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，重組質(zhì)粒pGPMT3帶有編碼金屬硫蛋白基因（tmG），金屬硫蛋白（TM）可高容量地結(jié)合重金屬離子，又可在細(xì)胞內(nèi)消除重金屬離子對細(xì)胞本身的毒害作用?？茖W(xué)家利用基因工程培育出能夠富集Ni²⁺的“超級細(xì)菌”一大腸桿菌JM1O9，用來凈化工業(yè)廢水，治理環(huán)境污染?；卮鹣铝袉栴}：
（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒pSUNI、pGPMT3所需要的兩種酶是

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

，培育“超級細(xì)菌”——大腸桿菌JM109所需的目的基因是

nixA、tmG

nixA、tmG

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（2）科研人員用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理大腸桿菌，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境DNA的生理狀態(tài)，再將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞。在大腸桿菌JM109細(xì)胞內(nèi)，nixA基因表達(dá)產(chǎn)物分布在大腸桿菌的

細(xì)胞膜

細(xì)胞膜

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（3）科研人員為檢測大腸桿菌JM109富集Ni²⁺的效果，在適宜的條件下培養(yǎng)原JM109、JM1O9+pSUNI，JM109+PSUNI+pGPMT3，在含有一定濃度Ni²⁺的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，檢測大腸桿菌菌體的數(shù)量和菌體中Ni²⁺的含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖所示。

該實(shí)驗(yàn)原JM109組的作用是

對照

對照

，JM1O9+pSUNI組的大腸桿菌數(shù)量最少的原因是

特異性的Ni²⁺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni²⁺轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，且沒有金屬硫蛋白（TM）消除Ni²⁺對自身細(xì)胞的毒害作用

特異性的Ni²⁺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白將較多Ni²⁺轉(zhuǎn)運(yùn)入細(xì)胞，且沒有金屬硫蛋白（TM）消除Ni²⁺對自身細(xì)胞的毒害作用

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（4）簡要寫出實(shí)驗(yàn)思路，探究大腸桿菌JM109富集Ni²⁺受廢水pH的影響。實(shí)驗(yàn)思路：

配制一系列含Ni²⁺的不同pH培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌JM109，一段時間后檢測各組培養(yǎng)液中Ni²⁺含量的變化

配制一系列含Ni²⁺的不同pH培養(yǎng)液培養(yǎng)大腸桿菌JM109，一段時間后檢測各組培養(yǎng)液中Ni²⁺含量的變化

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