新冠病毒核酸檢測(cè)的原理為實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）檢測(cè)法，技術(shù)流程如圖所示，在PCR擴(kuò)增時(shí)加入能與目的基因（新冠病毒的N基因）結(jié)合的熒光探針，①②③表示相關(guān)步驟?；卮鹣铝袉?wèn)題：

（1）qPCR過(guò)程中，需先以RNA為模板合成cDNA，故裝置中需添加酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

。為確保新冠病毒核酸檢測(cè)的準(zhǔn)確性，在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)必須依據(jù)新冠病毒RNA中的

特異性核苷酸序列

特異性核苷酸序列

來(lái)進(jìn)行。PCR過(guò)程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是

復(fù)性

復(fù)性

。
（2）根據(jù)熒光探針功能分析，熒光探針中堿基序列的設(shè)計(jì)應(yīng)主要依據(jù)。在配制PCR擴(kuò)增液時(shí)，加入的熒光探針序列為5'-TTGCT……AGATT-3'，如果模板中存在N基因序列，與探針結(jié)合的序列應(yīng)該是5'-

新冠病毒的N基因的堿基序列—AATCT……AGCAA—

新冠病毒的N基因的堿基序列—AATCT……AGCAA—

-3'。如果某人沒(méi)有感染新冠病毒，則進(jìn)行PCR時(shí)DNA實(shí)時(shí)熒光信號(hào)強(qiáng)度

不變

不變

（填“增強(qiáng)”“減弱”或“不變”）。
（3）還可對(duì)新冠病毒進(jìn)行免疫學(xué)檢測(cè)，向小鼠體內(nèi)注射新冠病毒S蛋白（決定病毒入侵易感細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白）后分離產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞，并與小鼠的骨髓瘤細(xì)胞融合，常用的融合方法有

PEG融合/滅活病毒誘導(dǎo)融合法

PEG融合/滅活病毒誘導(dǎo)融合法

（答出1種）；再經(jīng)多次篩選、檢測(cè)，獲得雜交瘤細(xì)胞，該種細(xì)胞的特點(diǎn)是

既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體

既能迅速大量增殖，又能產(chǎn)生與S蛋白特異性結(jié)合的專一抗體

。在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)，獲得大量可與S蛋白特異性結(jié)合的單克隆抗體作為診斷試劑。