幽門螺桿菌（Hp）是消化性潰瘍、慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，Hp可產(chǎn)生極為豐富的高活性的脲醇，免疫接種對Hp感染具有預(yù)防作用。研究者利用基因工程制備Hp疫苗的部分流程如圖所示，圖中①一④代表實驗步驟；bp代表堿基對；Ampr代表氨芐西林抗性基因，▼代表限制酶的酶切位點；酶1與酶2識別不同的核苷酸序列?；卮鹣铝袉栴}；
（1）采用PCR技術(shù)擴增lpp20基因時，需要加入DNA聚合酶，其作用是 催化合成DNA子鏈催化合成DNA子鏈。通過控制 溫度溫度使DNA復(fù)制在體外反復(fù)進行。在實際操作時，加入四種脫氧核苷三磷酸作為DNA復(fù)制的原料，每接入一個核苷酸，伴隨若兩個特殊化學(xué)鍵斷裂。
（2）質(zhì)粒pZY的作用是 將目的基因（lpp20基因）導(dǎo)入大腸桿菌將目的基因（lpp20基因）導(dǎo)入大腸桿菌。在步驟③中一般先用Ca2+處理大腸桿菌細胞，原因是 經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力增強經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力增強。
（3）步驟②中，已知在氨芐西林抗性基因內(nèi)有一段堿基序列
，則圖中酶1和酶2的最佳組合是 HindⅢ和XbaⅠHindⅢ和XbaⅠ（注；SpeⅠ：A↓CTAGT；HindⅢ：A↓AGCTT；XbaⅠ：T↓CTAGA）。步驟④中使用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)，目的是 將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來。
（4）臨床上用14C呼氣試驗檢測人體是否感染Hp,其基本原理是； Hp產(chǎn)生的脲酶能將14C標(biāo)記的尿素分解為氨和12CO2Hp產(chǎn)生的脲酶能將14C標(biāo)記的尿素分解為氨和12CO2。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】催化合成DNA子鏈；溫度；將目的基因（lpp20基因）導(dǎo)入大腸桿菌；經(jīng)Ca2+處理的大腸桿菌吸收周圍環(huán)境中DNA分子的能力增強；HindⅢ和XbaⅠ；將含目的基因（lpp20基因）的大腸桿菌細胞篩選出來；Hp產(chǎn)生的脲酶能將14C標(biāo)記的尿素分解為氨和12CO2
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：6引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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