擬南芥中的生長(zhǎng)素運(yùn)輸?shù)鞍祝≒IN1）對(duì)生長(zhǎng)素的極性運(yùn)輸具有重要作用。為研究35S啟動(dòng)子（一種來(lái)自病毒的強(qiáng)啟動(dòng)子）能否引起下游基因的過(guò)量表達(dá)，研究人員將35S啟動(dòng)子與PINI基因轉(zhuǎn)入擬南芥，觀察PIN1過(guò)量表達(dá)對(duì)擬南芥的影響。回答下列問(wèn)題：
（1）研究人員獲取含PINl基因的mRNA后，通過(guò)逆轉(zhuǎn)錄獲得DNA，再以DNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增獲取PINI基因，該過(guò)程需要的原料是 4種脫氧核苷酸4種脫氧核苷酸。PCR循環(huán)時(shí)，首先需要將溫度上升到90℃，目的是 使雙鏈DNA 解聚為單鏈使雙鏈DNA 解聚為單鏈。
（2）PCR擴(kuò)增PIN1基因時(shí)，需要兩種引物，據(jù)圖1分析，應(yīng)選擇引物 1、21、2。圖1、2中的PstⅠ、EcoRⅠ、XhoⅠ表示限制酶，為使獲取的 PINl 基因與質(zhì)粒正確連接，根據(jù)圖1、2分析，應(yīng)當(dāng)選擇的限制酶是 PstⅠ、EcoRⅠPstⅠ、EcoRⅠ。
（3）獲取PINI基因后，需要將35S啟動(dòng)子與 PINI基因一起構(gòu)建為基因表達(dá)載體，35S啟動(dòng)子的作用是 作為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng) PINI 基因轉(zhuǎn)錄出mRNA作為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng) PINI 基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
（4）為檢測(cè)目的基因是否導(dǎo)入擬南芥，在分子水平上，實(shí)驗(yàn)人員先從轉(zhuǎn)基因擬南芥的DNA中擴(kuò)增出35S啟動(dòng)子和PINl基因，然后采用電泳來(lái)鑒定35S啟動(dòng)子，但不鑒定 PINl基因，其理由是 擬南芥細(xì)胞中原本存在 PINI 基因，檢測(cè) PINI 基因無(wú)法確定外源 PIN1 基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞擬南芥細(xì)胞中原本存在 PINI 基因，檢測(cè) PINI 基因無(wú)法確定外源 PIN1 基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。在個(gè)體水平上，還可以采取的檢測(cè)方法是 對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥噴灑適宜濃度的除草劑，觀察其能否存活對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥噴灑適宜濃度的除草劑，觀察其能否存活。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】4種脫氧核苷酸；使雙鏈DNA 解聚為單鏈；1、2；PstⅠ、EcoRⅠ；作為RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合位點(diǎn)，驅(qū)動(dòng) PINI 基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；擬南芥細(xì)胞中原本存在 PINI 基因，檢測(cè) PINI 基因無(wú)法確定外源 PIN1 基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞；對(duì)轉(zhuǎn)基因擬南芥噴灑適宜濃度的除草劑，觀察其能否存活
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/4 8:0:9組卷：10引用：3難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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