研究人員將大麥細(xì)胞的LTP1基因?qū)肫【平湍妇?，獲得的啤酒酵母菌可產(chǎn)生LTP1蛋白，并釀出泡沫更加豐富的啤酒，如圖為轉(zhuǎn)基因啤酒酵母的生產(chǎn)過(guò)程?；卮鹣铝袉?wèn)題：
?
（1）已知DNA復(fù)制時(shí)子鏈的延伸方向是5'→3'，圖1中A、B、C、D在不同情況下均可以作為引物，用PCR技術(shù)擴(kuò)增LTP1基因時(shí)應(yīng)該選用

B、C

B、C

作為引物。
（2）

構(gòu)建基因表達(dá)載體

構(gòu)建基因表達(dá)載體

是實(shí)施基因工程的核心。圖2中的B為質(zhì)粒，質(zhì)粒和LTP1基因結(jié)合形成重組質(zhì)粒C。重組質(zhì)粒C在受體細(xì)胞中能夠穩(wěn)定存在并發(fā)揮作用，在LTP1基因的首端必須具有

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

，尾端必須具有終止子，還必須含有標(biāo)記基因和目的基因。
（3）為檢測(cè)目的基因在受體細(xì)胞基因組中的整合情況，首先采用DNA分子雜交技術(shù)檢測(cè)LTP1基因是否導(dǎo)入成功，需要從轉(zhuǎn)基因啤酒酵母中提取DNA，用

標(biāo)記的目的基因（LTP1基因）

標(biāo)記的目的基因（LTP1基因）

作探針與之雜交。
（4）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因啤酒酵母是否產(chǎn)生LTP1蛋白，除檢測(cè)LTP1蛋白是否產(chǎn)生及含量外，還可觀察轉(zhuǎn)基因啤酒酵母所釀啤酒的

泡沫豐富程度

泡沫豐富程度

進(jìn)行判斷，若能檢測(cè)到LTP1蛋白，但效果差，可能的原因是

LTP1基因表達(dá)效率低，合成的LTP1蛋白少

LTP1基因表達(dá)效率低，合成的LTP1蛋白少

；若經(jīng)檢測(cè)確定細(xì)胞中無(wú)LTP1蛋白，可采用PCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞中的RNA，如果能檢測(cè)到mRNA，則可能是

未能正常翻譯

未能正常翻譯

；如果檢測(cè)后確定細(xì)胞中無(wú)LTP1蛋白的mRNA，但之前能檢測(cè)到LTP1基因，則LTP1基因未能正常轉(zhuǎn)錄的原因可能是

LTP1基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中

LTP1基因反向插入質(zhì)粒DNA分子中

。