熒光定量PCR技術(shù)可定量檢測(cè)樣本中的DNA含量，其原理是：在PCR反應(yīng)體系中加入與某條模板鏈互補(bǔ)的熒光探針，當(dāng)TaqDNA聚合酶催化子鏈延伸至探針處時(shí)會(huì)水解探針，使熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一次，就有一個(gè)熒光分子生成，如圖1所示；在某次檢測(cè)過程中，得到一條熒光強(qiáng)度的變化曲線，如圖2所示，其中閾值是指反應(yīng)過程中達(dá)到設(shè)定閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。回答下列問題：

（1）PCR技術(shù)的原理是

DNA半保留復(fù)制

DNA半保留復(fù)制

，子鏈延伸的方向是5′端→3′端，原因是

DNA聚合酶只能從引物的3'端添加脫氧核苷酸

DNA聚合酶只能從引物的3'端添加脫氧核苷酸

。
（2）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增DNA的過程中，向PCR擴(kuò)增儀中加入了MgCl₂，脫氧核苷酸、引物和模板DNA等物質(zhì)，其中MgCl₂的作用是

激活DNA聚合酶

激活DNA聚合酶

，該過程需要加入耐高溫的DNA聚合酶，不需要加入解旋酶的原因是

PCR利用高溫使DNA雙鏈解開

PCR利用高溫使DNA雙鏈解開

。在PCR擴(kuò)增完成后，常使用

瓊脂糖凝膠電泳

瓊脂糖凝膠電泳

 法來鑒定PCR的產(chǎn)物。
（3）當(dāng)PCR循環(huán)到一定次數(shù)時(shí)，會(huì)出現(xiàn)“平臺(tái)期”，即熒光強(qiáng)度不再增加，此時(shí)限制因素可能是

熒光探針的數(shù)量、引物的數(shù)量、原料的數(shù)量

熒光探針的數(shù)量、引物的數(shù)量、原料的數(shù)量

（答出2點(diǎn)）。
（4）為了讓哺乳動(dòng)物能夠批量生產(chǎn)藥物，研究人員將利用PCR技術(shù)獲取的藥用蛋白基因與乳腺中特異性表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件重組在一起，通過

顯微注射

顯微注射

的方法導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的受精卵中，導(dǎo)入并培育成功后，該藥用蛋白基因在

乳腺

乳腺

細(xì)胞中表達(dá)。