1965年中國(guó)科學(xué)家人工合成了具有生物活性的結(jié)晶牛胰島素，摘取了人工合成蛋白質(zhì)的桂冠，如圖是利用基因工程生產(chǎn)人胰島素過(guò)程中使用的質(zhì)粒及目的基因的部分結(jié)構(gòu)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
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（1）質(zhì)粒上ori序列的堿基特點(diǎn)是 A和TA和T比值較高，圖示胰島素基因的轉(zhuǎn)錄以 ②②鏈作為模板。
（2）在設(shè)計(jì)PCR引物時(shí)最好在引物的 5′5′端添加限制酶 EcoRⅠ和XhoⅠEcoRⅠ和XhoⅠ的識(shí)別序列，PCR反應(yīng)體系中引物的延伸需要TaqDNA聚合酶，此酶需要 Mg2+Mg2+（離子）的激活。
（3）生產(chǎn)過(guò)程中目的基因是利用胰島B細(xì)胞中的mRNA反轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因，不直接使用細(xì)胞中酶切獲得的的胰島素基因原因是 胰島B細(xì)胞中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因中無(wú)內(nèi)含子序列。能夠在大腸桿菌中表達(dá)正確的蛋白質(zhì)胰島B細(xì)胞中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因中無(wú)內(nèi)含子序列。能夠在大腸桿菌中表達(dá)正確的蛋白質(zhì)。
（4）科學(xué)家運(yùn)用大引物PCR定點(diǎn)突變技術(shù)對(duì)胰島素第28位氨基酸實(shí)現(xiàn)了替換，獲得了速效胰島素類(lèi)似物產(chǎn)品。相關(guān)原理如圖所示。
①第一次PCR至少需要 22個(gè)循環(huán)才能獲得相應(yīng)的大引物模板，第二次PCR應(yīng)選用大引物兩條鏈中的 BB（填“A”或“B”），若第二次PCR計(jì)劃循環(huán)n次，至少需要大引物 2n-12n-1個(gè)。
②β-半乳糖苷酶可以分解無(wú)色的X-gal產(chǎn)生藍(lán)色物質(zhì)使菌落呈現(xiàn)藍(lán)色，否則菌落為白色。將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種到添加了 氨芐青霉素和X-ga1氨芐青霉素和X-ga1的培養(yǎng)基上，若觀察到菌落呈現(xiàn)白色，則表明 該菌落即為含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落該菌落即為含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】A和T；②；5′；EcoRⅠ和XhoⅠ；Mg2+；胰島B細(xì)胞中的mRNA逆轉(zhuǎn)錄得到的胰島素基因中無(wú)內(nèi)含子序列。能夠在大腸桿菌中表達(dá)正確的蛋白質(zhì)；2；B；2n-1；氨芐青霉素和X-ga1；該菌落即為含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/10/12 15:0:1組卷：22引用：4難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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