利用基因工程生產(chǎn)人胰島素有兩種方法。
方法一：將胰島素基因轉(zhuǎn)入細(xì)菌細(xì)胞。進(jìn)行微生物培養(yǎng)，提取胰島素。
方法二：將胰島素基因轉(zhuǎn)入哺乳動(dòng)物的受精卵，培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因動(dòng)物并從其乳汁中提取胰島素。
（1）使用方法一時(shí)，在細(xì)菌細(xì)胞中合成的胰島素原需在

蛋白酶

蛋白酶

（填“蛋白酶”、“DNA酶”或“脂肪酶”）的作用下才能變成具有活性的胰島素；為使胰島素基因能順利進(jìn)入細(xì)菌細(xì)胞，應(yīng)用

Ca²⁺

Ca²⁺

處理細(xì)菌細(xì)胞。
（2）方法二將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞常用的方法是

顯微注射法

顯微注射法

，要保人胰島素基因只在哺乳動(dòng)物的乳腺細(xì)胞中表達(dá)，應(yīng)該采取的措施是在人胰島素基因的首端加上

乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件

乳腺中特異表達(dá)的基因的啟動(dòng)子等調(diào)控元件

。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物進(jìn)入泌乳期后，可以通過分泌的乳汁來生產(chǎn)所需的藥品，因此稱為

乳腺生物反應(yīng)器

乳腺生物反應(yīng)器

。
（3）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增胰島素基因的前提是已知胰島素基因兩端的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列

合成引物

合成引物

，每次循環(huán)可以分為

變性、復(fù)性和延伸

變性、復(fù)性和延伸

三步。
（4）培育轉(zhuǎn)基因生物的核心工作是構(gòu)建基因表達(dá)載體，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；使目的基因能夠在受體細(xì)胞中表達(dá)和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且遺傳給下一代；使目的基因能夠在受體細(xì)胞中表達(dá)和發(fā)揮作用

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