PCR技術(shù)在分子生物學(xué),臨床醫(yī)學(xué)、考古學(xué)等眾多領(lǐng)域取得了巨大成就,當(dāng)前新冠病毒核酸檢測(cè)就需要借助PCR技術(shù)。據(jù)此回答下列問題。
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使目的基因DNA受熱變性,DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是 DNA中G和C之間有三個(gè)氫鍵,A和T之間只有兩個(gè)氫鍵,G+C含量越多,其氫鍵越多,變性時(shí)所需溫度越高DNA中G和C之間有三個(gè)氫鍵,A和T之間只有兩個(gè)氫鍵,G+C含量越多,其氫鍵越多,變性時(shí)所需溫度越高。進(jìn)行PCR時(shí)一般需要加入4種脫氧核苷三磷酸(dNTP),其作用是 為反應(yīng)提供原料和能量為反應(yīng)提供原料和能量。
(2)新冠病毒是一種RNA病毒,檢測(cè)新冠病毒RNA(核酸檢測(cè))可以采取“熒光RT-PCR法”,該過程中需要用到的酶有 逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶。采集到的樣本要迅速進(jìn)行病毒滅活處理,其目的是 提高樣本轉(zhuǎn)運(yùn)和檢測(cè)階段的安全性提高樣本轉(zhuǎn)運(yùn)和檢測(cè)階段的安全性。
(3)擴(kuò)增后的核酸通過熒光標(biāo)記的基因探針進(jìn)行檢測(cè),理論上,在檢測(cè)過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測(cè)結(jié)果呈 陽陽(填陰或陽)性,此時(shí)可進(jìn)一步檢測(cè)疑似患者血漿中的 新冠病毒(IgM/IgG)抗體新冠病毒(IgM/IgG)抗體進(jìn)行確診,原因是 病毒進(jìn)入體內(nèi)后可引起特異性免疫反應(yīng),最終由漿細(xì)胞分泌相應(yīng)的抗體病毒進(jìn)入體內(nèi)后可引起特異性免疫反應(yīng),最終由漿細(xì)胞分泌相應(yīng)的抗體。
(4)目前接種疫苗是預(yù)防新冠疫情最有效的措施,分析利用PCR技術(shù)制備新冠病毒疫苗的主要思路:利用RT-PCR技術(shù)大量擴(kuò)增新冠病毒特定抗原基因生成cDNA,制備成DNA疫苗利用RT-PCR技術(shù)大量擴(kuò)增新冠病毒特定抗原基因生成cDNA,制備成DNA疫苗(答出1種情況即可)。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】DNA中G和C之間有三個(gè)氫鍵,A和T之間只有兩個(gè)氫鍵,G+C含量越多,其氫鍵越多,變性時(shí)所需溫度越高;為反應(yīng)提供原料和能量;逆轉(zhuǎn)錄酶、TaqDNA聚合酶;提高樣本轉(zhuǎn)運(yùn)和檢測(cè)階段的安全性;陽;新冠病毒(IgM/IgG)抗體;病毒進(jìn)入體內(nèi)后可引起特異性免疫反應(yīng),最終由漿細(xì)胞分泌相應(yīng)的抗體;利用RT-PCR技術(shù)大量擴(kuò)增新冠病毒特定抗原基因生成cDNA,制備成DNA疫苗
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/11/19 13:30:2組卷:5引用:3難度:0.5
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1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對(duì)定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6 -
2.PCR技術(shù)不僅可以擴(kuò)增目的基因,還可用于定點(diǎn)誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點(diǎn)突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進(jìn)行兩次PCR,其操作步驟為:
①根據(jù)目的基因序列設(shè)計(jì)引物,得到兩個(gè)常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計(jì)突變上游引物,突變位點(diǎn)位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進(jìn)行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
④用得到的下游大引物中和另一個(gè)常規(guī)上游引物進(jìn)行第二次PCR擴(kuò)增,得到突變目的基因序列?;卮鹣铝袉栴}:
(1)PCR擴(kuò)增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
(2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
(3)如果要利用微生物進(jìn)一步克隆PCR定點(diǎn)誘變產(chǎn)物,其步驟包括:發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6 -
3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯(cuò)誤的是( )
發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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