為增加油菜種子的含油量，研究人員嘗試將陸地棉的酶D基因與擬南芥葉綠體膜上的轉(zhuǎn)運肽基因相連，導(dǎo)入油菜葉片細胞并獲得了轉(zhuǎn)基因油菜品種。
（1）從陸地棉基因文庫中獲取酶D基因，一般用PCR技術(shù)擴增，PCR擴增過程中，需加熱至90?95℃，其目的是使雙鏈DNA解聚為單鏈使雙鏈DNA解聚為單鏈；加熱至70?75℃時，互補鏈可在熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）酶的作用下延伸。
（2）如圖甲，選用限制酶CiaⅠCiaⅠ處理兩個基因后再用DNA連接DNA連接酶處理，得到A、DA、D（填圖中字母）端相連的融合基因。
（3）將上述融合基因插入圖乙所示Ti質(zhì)粒的T一DNA中，構(gòu)建基因表達載體基因表達載體并導(dǎo)入農(nóng)桿菌中。將獲得的農(nóng)桿菌接種在含四環(huán)素四環(huán)素（填“氨芐青霉素”、“卡那霉素”、“四環(huán)素”或“鏈霉素”等抗生素）的固體平板上培養(yǎng)得到單菌落，再利用液體培養(yǎng)基振蕩培養(yǎng)，得到用于轉(zhuǎn)化的侵染液。
（4）剪取油菜的葉片放入侵染液中一段時間，此過程的目的是將目的基因?qū)胧荏w細胞將目的基因?qū)胧荏w細胞，進一步篩選后獲得轉(zhuǎn)基因油菜。
（5）在分子水平上，用抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交方法檢驗融合基因是否表達成功。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】使雙鏈DNA解聚為單鏈；熱穩(wěn)定DNA聚合（或Taq）；CiaⅠ；DNA連接；A、D；基因表達載體；四環(huán)素；將目的基因?qū)胧荏w細胞；抗原-抗體雜交
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：3難度：0.6
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1．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達載體，常用將基因表達載體導(dǎo)入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
2．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="http://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7