擬南芥（2N=10）屬于十字花科植物，自花傳粉，被譽為“植物界的果蠅”，廣泛應用于植物遺傳學研究。擬南芥細胞中存在某種轉(zhuǎn)錄因子能夠明顯提高其他基因的表達水平。研究人員將從擬南芥細胞中獲取的轉(zhuǎn)錄因子轉(zhuǎn)移到大豆細胞內(nèi)，并使其過量表達，發(fā)現(xiàn)大豆中油酸和亞油酸的含量顯著提高。圖中限制酶EcoRV的酶切位點為-GAT↓ATC-。
（1）質(zhì)粒Po具有氨芐青霉素抗性基因（amp'）和四環(huán)素抗性基因（tetr），對其進行切割時應該注意 所選的限制酶所識別的序列不能同時存在于氨青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中所選的限制酶所識別的序列不能同時存在于氨青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中，以便篩選重組質(zhì)粒。
（2）P3質(zhì)粒導入受體細胞通常使用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，若受體細胞能夠表現(xiàn)氨芐青霉素抗性，不能不能（填“能”或“不能”）說明目的基因已成功導入受體細胞，并說出理由：有可能是導入了不含目的基因的質(zhì)粒PO有可能是導入了不含目的基因的質(zhì)粒PO。
（3）受體細胞能夠培育出轉(zhuǎn)基因大豆植株的原因是 植物細胞具有全能性植物細胞具有全能性。
（4）為了獲得大量的目的基因，可以采用PCR技術(shù)進行擴增，PCR技術(shù)依據(jù)的原理是 DNA半保留復制DNA半保留復制。PCR過程每次循環(huán)分為3步，其中溫度最低的一步是 復性復性PCR擴增完成后，常采用瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。在凝膠中DNA分子的遷移速率與 凝膠的濃度凝膠的濃度等有關(guān)。
（5）利用PCR技術(shù)，在引物的某個特定位點引入一個或多個不能與目的基因配對的堿基，就可以在目的基因中帶來定點突變，據(jù)此獲得的目的基因再經(jīng)表達、純化獲得蛋白質(zhì)，該過程屬于 蛋白質(zhì)工程蛋白質(zhì)工程（填工程技術(shù)）的范疇。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】所選的限制酶所識別的序列不能同時存在于氨青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因之中；不能；有可能是導入了不含目的基因的質(zhì)粒PO；植物細胞具有全能性；DNA半保留復制；復性；凝膠的濃度；蛋白質(zhì)工程
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/29 8:0:10組卷：3引用：2難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
（3）培育轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種的核心工作是圖中過程（填序號）。過程②③采用的方法是。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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