人參皂苷F1作為一種稀有人參皂苷，很難直接從天然人參植物中提取。已知在人參屬植物三七中具有與人參皂苷F1合成相關(guān)的PnDDS、CYP12H、CYP6H和UGTPn20四個關(guān)鍵基因，本研究通過在煙草中表達(dá)這四個基因，首次獲得能夠產(chǎn)生人參皂苷F1的轉(zhuǎn)基因煙草株系和細(xì)胞系，研究過程如圖1所示。請回答下列問題：
（1）①過程需要 逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶的催化，步驟②中利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，其原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。進(jìn)行PCR反應(yīng)時需要加熱到90～95℃，目的是 DNA受熱變性后解鏈為單鏈DNA受熱變性后解鏈為單鏈。
（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，通常用雙酶切的好處是 避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化；避免目的基因和質(zhì)粒的反向連接避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化；避免目的基因和質(zhì)粒的反向連接（答出2點(diǎn)）。
（3）該實(shí)驗(yàn)所用的農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒如圖2所示，據(jù)圖可知應(yīng)在添加 潮霉素潮霉素的培養(yǎng)基中篩選導(dǎo)入目的基因的煙草愈傷組織細(xì)胞。煙草細(xì)胞經(jīng)過 脫分化脫分化過程形成煙草愈傷組織細(xì)胞，該過程 沒有沒有（填“有”或“沒有”）體現(xiàn)細(xì)胞全能性。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶；DNA雙鏈復(fù)制；DNA受熱變性后解鏈為單鏈；避免目的基因和質(zhì)粒的自身環(huán)化；避免目的基因和質(zhì)粒的反向連接；潮霉素；脫分化；沒有
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/7/9 8:0:8組卷：1引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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