轉(zhuǎn)染是指利用一定手段使外源基因進(jìn)入細(xì)胞中并穩(wěn)定表達(dá)的過(guò)程。腺病毒載體常用于外源基因的轉(zhuǎn)染，這在基因治療、疫苗研發(fā)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的可視化監(jiān)控方面有著廣闊的應(yīng)用前景?；卮鹣铝袉?wèn)題。
（1）腺病毒營(yíng)寄生寄生活，用作轉(zhuǎn)染的腺病毒載體上具有RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是外源基因在受體細(xì)胞中啟動(dòng)表達(dá)的關(guān)鍵。
（2）構(gòu)建腺病毒載體時(shí)，先用同種限制酶對(duì)腺病毒DNA和外源基因進(jìn)行切割，可獲得相同的黏性末端或平末端黏性末端或平末端，再用DNA連接酶恢復(fù)被限制酶切開(kāi)的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（3）通過(guò)腺病毒載體將藍(lán)色熒光基因轉(zhuǎn)染山羊耳緣成纖維細(xì)胞，利用藍(lán)色熒光直觀監(jiān)控細(xì)胞的體外培養(yǎng)過(guò)程。首先將山羊耳緣組織塊用胰蛋白酶或膠原蛋白酶膠原蛋白酶處理得到單個(gè)成纖維細(xì)胞，培養(yǎng)至貼滿瓶壁時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制細(xì)胞的接觸抑制。這時(shí)，重新用胰蛋白酶等處理，然后分瓶繼續(xù)進(jìn)行傳代傳代培養(yǎng)。培養(yǎng)時(shí)使用的合成培養(yǎng)基，通常需加入血清、血漿血清、血漿等一些天然成分，以滿足細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的全面需求。
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過(guò)程．
【答案】寄生；RNA聚合酶；黏性末端或平末端；磷酸二酯鍵；膠原蛋白酶；細(xì)胞的接觸抑制；傳代；血清、血漿
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：1難度：0.7
相似題
-
1．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細(xì)胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項(xiàng)技術(shù)的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動(dòng)物克隆和胚胎工程有關(guān)的問(wèn)題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。在進(jìn)行基因工程操作時(shí)，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動(dòng)物成纖維細(xì)胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長(zhǎng)等措施。當(dāng)?shù)谝粋€(gè)卡氏瓶中的細(xì)胞濃度不再增加時(shí)，若要細(xì)胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯(cuò)誤的是
A．在動(dòng)物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進(jìn)行胚胎分割，內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動(dòng)物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細(xì)胞進(jìn)一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細(xì)胞可以用于胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)，因?yàn)槠淠芊置谝种萍?xì)胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國(guó)際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬(wàn)成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對(duì)其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長(zhǎng)至鋪滿培養(yǎng)皿底時(shí)停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來(lái)說(shuō)，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點(diǎn)）。
（2）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學(xué)家將胰島素β鏈的第28和29個(gè)氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對(duì)進(jìn)行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測(cè)胰島類似細(xì)胞是否具有胰島B細(xì)胞的正常生理功能，可設(shè)計(jì)如下實(shí)驗(yàn)：將等量的胰島類似細(xì)胞與正常胰島B細(xì)胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進(jìn)行培養(yǎng)，一段時(shí)間后分別檢測(cè)兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點(diǎn)是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~