動物細(xì)胞的培養(yǎng)傳代比較困難,為長期保存動物的基因組,一般利用大腸桿菌構(gòu)建基因組文庫,具體流程如圖所示。回答下列問題:
(1)一種生物的基因組文庫含有該種生物 全部全部(填“部分”或“全部”)的基因。為保證載體和基因組DNA片段能夠連接,載體要先用 EcoRⅠEcoRⅠ(酶)處理。將基因組DNA導(dǎo)入大腸桿菌菌群前,大腸桿菌需要提前用 Ca2+Ca2+處理,使其處于感受態(tài)。
(2)研究者需要從基因組文庫中獲取動物細(xì)胞的Y基因進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增DNA時,需要在反應(yīng)體系中添加的有機(jī)物質(zhì)有 引物、模板DNA、Taq酶引物、模板DNA、Taq酶和4種脫氧核苷酸,該技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是 DNA復(fù)制DNA復(fù)制。
(3)甲鏈為Y基因的轉(zhuǎn)錄模板鏈,乙鏈為甲鏈的互補(bǔ)鏈。轉(zhuǎn)化之后,為了判斷Y基因是否進(jìn)入受體細(xì)胞,可以用 標(biāo)記的Y基因的甲(或乙)標(biāo)記的Y基因的甲(或乙)鏈片段作為探針;為判斷目的基因是否成功轉(zhuǎn)錄,可以用 標(biāo)記的Y基因的甲標(biāo)記的Y基因的甲鏈片段作為探針。
【考點(diǎn)】目的基因的篩選與獲取.
【答案】全部;EcoRⅠ;Ca2+;引物、模板DNA、Taq酶;DNA復(fù)制;標(biāo)記的Y基因的甲(或乙);標(biāo)記的Y基因的甲
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:49引用:6難度:0.7
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1.通過設(shè)計(jì)引物,運(yùn)用PCR技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)目的基因的定點(diǎn)誘變。如圖為基因工程中獲取突變基因的過程,其中引物1序列中含有一個堿基T不能與目的基因片段配對,但不影響引物與模板鏈的整體配對,反應(yīng)體系中引物1和引物2的5′端分別設(shè)計(jì)增加限制酶a和限制酶b的識別位點(diǎn)。有關(guān)敘述正確的是( )
A.在PCR反應(yīng)體系中還需要加入4種游離核苷酸、解旋酶、Taq酶等 B.第2輪PCR,引物1能與圖中②結(jié)合并且形成兩條鏈等長的突變基因 C.引物中設(shè)計(jì)兩種限制酶識別位點(diǎn)有利于目的基因定向插入運(yùn)載體 D.第3輪PCR結(jié)束后,含突變堿基對且兩條鏈等長的DNA占 12發(fā)布:2024/11/19 10:30:1組卷:116引用:5難度:0.7 -
2.雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對的方式加到正在復(fù)制的DNA子鏈中后,子鏈的延伸立即終止。現(xiàn)通過PCR技術(shù)獲得被標(biāo)記且以堿基“T”為末端的、不同長度的DNA子鏈片段。在反應(yīng)管中已經(jīng)有單鏈模板、引物、相關(guān)的酶和相應(yīng)的緩沖液等,還需加入的原料是( ?。?br />
①dCTP,dGTP,dATP
②dGTP,dATP,dTTP,dCTP
③α位被32P標(biāo)記的ddTTP
④γ位被32P標(biāo)記的ddTTPA.①③ B.①④ C.②③ D.②④ 發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:27引用:1難度:0.6 -
3.目前研究混雜DNA群體中的特異DNA序列,一般基于兩種不同的方法,即DNA克隆和DNA分子雜交,如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.方法①需要限制酶和DNA連接酶 B.方法②需要解旋酶和DNA聚合酶 C.方法③需要對探針進(jìn)行特殊標(biāo)記 D.方法①②③都遵循堿基互補(bǔ)配對原則 發(fā)布:2024/11/22 4:0:1組卷:22引用:2難度:0.6
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