鋁在土壤中常以鋁酸鹽的形式存在，可造成土壤酸化而影響植物生長。鋁能抑制植物根尖細胞的分裂，破壞根組織。某植物甲的根毛細胞的細胞膜上存在蘋果酸通道蛋白（ALMT），該通道蛋白能將蘋果酸轉運到細胞外來緩解鋁毒?？蓪⒖刂艫LMT的基因導入不耐鋁的植物中，最終獲得耐鋁植物。請回答下列問題：
（1）如表是運載體上出現(xiàn)的幾種限制酶的識別序列及切割位點。用表中的限制酶切割 DNA后能形成相同黏性末端的是 XhoI與SalIXhoI與SalI。（識別序列中的1表示酶切位點）
| 限制酶 | 識別序列和切割位點 |
| EcoRⅠ | G↓AATTC |
| BamHⅠ | G↓GATCC |
| HindⅢ | A↓AGCTT |
| XhoⅠ | C↓TCGAG |
| NdeⅠ | CA↓TATG |
| SalⅠ | G↓TCGAC |
植物甲的根（根毛）細胞
植物甲的根（根毛）細胞
細胞中獲取總mRNA，在相應酶作用下獲得多種cDNA，再利用ALMT基因制作出特異性 引物
引物
，通過PCR方法得到ALMT基因的cDNA。（3）啟動子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識別并結合的位點，能調控目的基因的表達。ALMT基因的啟動子有兩種類型，其中α啟動子能使ALMT基因在酸性土壤的誘導下表達，β啟動子能使ALMT基因高效表達而無需酸性誘導。在獲得轉ALMT基因耐鋁植物時應使用 α
α
啟動子，不使用另外一種啟動子的原因是 β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉運有機酸
β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉運有機酸
，導致正常土壤酸化，并影響植物生長。（4）科研人員采用農桿菌轉化法，首先將ALM基因導入植物細胞并整合到受體細胞染色體的DNA上，再通過
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
技術成功獲得了耐鋁植株。（5）若將一株耐鋁植株與普通植株雜交，得到的后代中耐鋁植株：普通植株約為3：1，則可判斷這株耐鋁植株細胞至少轉入了
2
2
個ALMT基因，轉入的基因在染色體上的位置關系是：分別位于兩條非同源染色體上
分別位于兩條非同源染色體上
；若使這株耐鋁植株自交，后代中耐鋁植株：普通植株約為 15：1
15：1
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】XhoI與SalI；植物甲的根（根毛）細胞；引物；RNA聚合酶；α；β啟動子可使植物根細胞持續(xù)轉運有機酸；植物組織培養(yǎng)；2；分別位于兩條非同源染色體上；15：1
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：10難度：0.6
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2難度：0.6
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