普通棉花中含β甘露糖苷酶基因（ChMmaA2），能在纖維細胞中特異性表達，產(chǎn)生的β甘露糖苷酶催化半纖維素降解，棉纖維長度變短。為了培育新的棉花品種，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達載體，利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入棉花細胞，成功獲得轉(zhuǎn)基因棉花品種，具體過程如圖。請分析回答：
（1）纖維細胞E6啟動子的元素組成為 C、H、O、N、PC、H、O、N、P基因表達載體除了圖示組成外，至少還有 復(fù)制原點、終止子、標記基因復(fù)制原點、終止子、標記基因等（至少答兩個），不能使用質(zhì)粒1中花椰菜病毒啟動子的原因是 纖維細胞中的RNA聚合酶不能識別和結(jié)合花椰菜病毒啟動子，反義GhMnaA2不能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA纖維細胞中的RNA聚合酶不能識別和結(jié)合花椰菜病毒啟動子，反義GhMnaA2不能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA
（2）PCR技術(shù)擴增β-甘露糖苷酶基因需要根據(jù) GhMnaA2兩端部分核苷酸序列GhMnaA2兩端部分核苷酸序列，設(shè)計特異性引物序列，假設(shè)開始時模板DNA數(shù)量為m個，PCR擴增5個循環(huán)，理論上需要的引物數(shù)量 62m62m，為保證ChMnaA2能插入到質(zhì)粒2中，還需要在引物的 5′5′端添加限制酶識別序列。
（3）③過程中用酶切法可鑒定正、反義表達載體。用SmaⅠ酶和NotⅠ酶切割正義基因表達載體獲得0.1kb、3.2kb、5.8kb、8.6kb四種長度的DNA片段，則用NotⅠ酶切反義基因表達載體獲得DNA片段的長度應(yīng)是5.9kb5.9kb和 11.8kb11.8kb。
（4）導入細胞內(nèi)的反義GhMnaA2能阻止β-甘露糖甘酶合成，使棉纖維變長的原理是 反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的反義RNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的反義RNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】C、H、O、N、P；復(fù)制原點、終止子、標記基因；纖維細胞中的RNA聚合酶不能識別和結(jié)合花椰菜病毒啟動子，反義GhMnaA2不能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA；GhMnaA2兩端部分核苷酸序列；62m；5′；5.9kb；11.8kb；反義GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的反義RNA能與棉花細胞內(nèi)的GhMnaA2轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制基因的表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/16 8:0:10組卷：11引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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