某動(dòng)物體內(nèi)含有研究者感興趣的目的基因，研究者欲將該基因?qū)氪竽c桿菌的質(zhì)粒中保存。該質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因（AmpR基因）、LacZ基因及一些酶切位點(diǎn)，其結(jié)構(gòu)和簡(jiǎn)單的操作步驟如圖所示。請(qǐng)根據(jù)以上信息回答下列問(wèn)題。
（1）在第②步中，應(yīng)選擇用 相同相同（相同/不同）的限制酶或切割能產(chǎn)生相同末端的限制酶切割質(zhì)粒和含有目的基因的DNA片段。限制酶的切割位點(diǎn) 不能不能（能/不能）位于目的基因的內(nèi)部，限制酶 不能不能（能/不能）破壞質(zhì)粒的啟動(dòng)子、終止子、標(biāo)記基因、復(fù)制原點(diǎn)等結(jié)構(gòu)。
（2）在第③步中，為了使質(zhì)粒DNA與目的基因能連接，還需要在混合物中加入 DNA連接酶DNA連接酶（限制酶/DNA連接酶）。
（3）選用含有AmpR基因和LacZ基因的質(zhì)粒的原因：AmpR基因AmpR基因（AmpR基因/LacZ基因）可用于檢測(cè)質(zhì)粒是否導(dǎo)入了大腸桿菌。由于LacZ基因的效應(yīng)，這些生長(zhǎng)的菌落可能出現(xiàn)兩種顏色：含有空質(zhì)粒（沒(méi)有連接目的基因的質(zhì)粒）的大腸桿菌菌落呈 藍(lán)色藍(lán)色（藍(lán)色/白色）；含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈 白色白色（藍(lán)色/白色）。
（4）含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌落呈白色的原因：目的基因的插入破壞了 LacZ基因的結(jié)構(gòu)，使其不能正常表達(dá)形成 β-半乳糖苷酶β-半乳糖苷酶，底物 X-gal也就不會(huì)被分解。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】相同；不能；不能；DNA連接酶；AmpR基因；藍(lán)色；白色；β-半乳糖苷酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：6引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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