基因工程可以賦予生物新的性狀,科研人員利用基因工程技術(shù)以期待獲得具備抗旱特性的小麥。請回答下列問題:
(1)研究發(fā)現(xiàn),某些植物的種子脫水?dāng)?shù)十年后復(fù)水仍能夠恢復(fù)活性,原因是細(xì)胞中積累海藻糖。科研人員擬將酵母菌的海藻糖合成酶基因(TPS)轉(zhuǎn)入小麥中。圖標(biāo)注了載體TPS基因的酶切位點和預(yù)期的基因表達(dá)載體的結(jié)構(gòu),表格列舉了限制酶的識別序列。
酶 | 識別序列 |
BamHⅠ | 5′GGATCC3′ |
SacⅠ | 5′GAGCTC3′ |
HindⅢ | 5′AAGCTT3′ |
XbaⅠ | 5′TCTAGA3′ |
DNA連接
DNA連接
酶將TPS基因拼接到載體的切口處,形成基因表達(dá)載體。②從圖分析,在TPS基因兩側(cè)引入的是
BamHI、SacI
BamHI、SacI
限制酶的酶切位點。設(shè)計的引物序列為 5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT
。(2)圖中Bar基因是抗除草劑基因?;虮磉_(dá)載體轉(zhuǎn)入細(xì)胞后,在獲得的植株葉片上涂抹除草劑,篩選出7株抗除草劑個體。Bar基因作為載體上的
標(biāo)記
標(biāo)記
基因輔助篩選TPS轉(zhuǎn)基因植株。(3)現(xiàn)對篩選出的抗除草劑個體進(jìn)行DNA水平的檢測。請?zhí)顚懕砀?,完成實驗設(shè)計:
組別 | 植株編號1-7 | 對照組1 | 對照組2 |
模板 | ① (提取的)1-7號植株DNA (提取的)1-7號植株DNA |
基因表達(dá)載體或TPS基因片段 | ② 空質(zhì)粒載體 空質(zhì)粒載體 |
PCR體系中其他物質(zhì) | 擴增緩沖液、水、引物、③ 4種脫氧核苷酸(或dNTP) 4種脫氧核苷酸(或dNTP) 、④Taq酶 Taq酶 |
||
電泳預(yù)期結(jié)果 | ⑤ 有條帶 有條帶 |
有條帶 | 沒有條帶 |
RR
RR
。【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA連接;BamHI、SacI;5’-GGATCCGAATCGAACGATTAGCAACT、5’-GAGCTCAGCCTAACGTACAAGTTCGT;標(biāo)記;(提取的)1-7號植株DNA;空質(zhì)粒載體;4種脫氧核苷酸(或dNTP);Taq酶;有條帶;RR
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/8/9 8:0:9組卷:75引用:8難度:0.6
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發(fā)布:2024/12/20 5:0:2組卷:35引用:5難度:0.6 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 發(fā)布:2024/12/20 3:30:1組卷:6引用:1難度:0.6
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