CRISPR/Cas9是一種高效的基因編輯技術(shù)，Cas9基因表達(dá)的Cas9蛋白像一把“分子剪刀”，在單鏈向?qū)NA（SgRNA）引導(dǎo)下，切割DNA雙鏈以敲除目標(biāo)基因或插入新的基因。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的工作原理如圖所示。回答相關(guān)問(wèn)題：
（1）過(guò)程①中，為構(gòu)建CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒，需用 同種限制酶同種限制酶對(duì)含有特定SgRNA編碼序列的DNA以及質(zhì)粒進(jìn)行酶切處理，再用 DNA連接酶DNA連接酶催化進(jìn)行連接。
（2）構(gòu)建完成CRISPR/Cas9重組質(zhì)粒后，需要采用 PCRPCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行擴(kuò)增，其原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制。
（3）過(guò)程②中，若受體細(xì)胞是大腸桿菌細(xì)胞，則導(dǎo)入前需要用 Ca2+Ca2+對(duì)其進(jìn)行處理，使其處于一種 能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（4）過(guò)程③～⑤中，SgRNA與Cas9蛋白形成復(fù)合體，該復(fù)合體中的SgRNA可識(shí)別并與目標(biāo)DNA序列特異性結(jié)合，此過(guò)程發(fā)生了堿基互補(bǔ)配對(duì)，和SgRNA中A、G配對(duì)的堿基分別是 T、CT、C。Cas9蛋白切割基因組DNA時(shí)，斷開(kāi)的是 磷酸二酯磷酸二酯鍵。
【答案】同種限制酶；DNA連接酶；PCR；DNA半保留復(fù)制；Ca2+；能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子的；T、C；磷酸二酯
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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