Cre酶是一種重組酶,LoxP是能被Cre酶識別的特異DNA序列,當(dāng)一條DNA鏈上存在兩個相同的LoxP序列且方向相同時,Cre酶能有效切除兩個位點間的DNA序列(如圖1)。因此Cre/LoxP重組酶系統(tǒng)能夠?qū)崿F(xiàn)特異位點的基因敲除、基因插入等操作。
(1)啟動子的功能是 驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;Cre酶與限制酶的功能類似,能將特定部位的兩個核苷酸之間的 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵斷開。
(2)據(jù)上圖分析,若細(xì)胞中不含有Cre酶,轉(zhuǎn)錄終止信號序列就會抑制下游GFP基因起作用,細(xì)胞無法發(fā)出熒光;若細(xì)胞中含有Cre酶,Cre酶會切除 轉(zhuǎn)錄終止信號序列和LoxP轉(zhuǎn)錄終止信號序列和LoxP,GFP基因就會 表達(dá)表達(dá),合成綠色熒光蛋白。
(3)當(dāng)細(xì)胞中存在多對Cre酶識別位點和熒光基因時,只有在啟動子之后且與啟動子相鄰的熒光蛋白基因才會表達(dá),借助大腦成像技術(shù),通過熒光蛋白“點亮”大腦內(nèi)的神經(jīng)元,試驗小鼠不同的腦組織細(xì)胞就會呈現(xiàn)不同的顏色,出現(xiàn)“腦彩虹”。
①若利用PCR技術(shù)擴(kuò)增LoxP基因,需要的引物有 B、CB、C(從圖2中A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。PCR反應(yīng)完成后,常采用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來鑒定PCR的產(chǎn)物。
②研究者利用限制酶和 DNA連接酶DNA連接酶酶構(gòu)建了含有熒光蛋白基因和Cre酶識別序列的基因表達(dá)載體(圖3),并將其導(dǎo)入小鼠細(xì)胞中,培育出了轉(zhuǎn)基因小鼠。若該小鼠腦細(xì)胞中存在Cre酶且僅識別LoxP2時,腦細(xì)胞的色彩為 黃色和藍(lán)色黃色和藍(lán)色。
【答案】驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA;磷酸二酯鍵;轉(zhuǎn)錄終止信號序列和LoxP;表達(dá);B、C;瓊脂糖凝膠電泳;DNA連接酶;黃色和藍(lán)色
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/7 8:0:9組卷:14引用:2難度:0.6
相似題
-
1.細(xì)胞衰老和干細(xì)胞耗竭是機(jī)體衰老的重要標(biāo)志,轉(zhuǎn)錄激活因子YAP是細(xì)胞發(fā)育和細(xì)胞命運決定中發(fā)揮重要作用的蛋白質(zhì)。研究人員利用CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)和定向分化技術(shù)來產(chǎn)生YAP特異性缺失的人胚胎干細(xì)胞,YAP缺失的干細(xì)胞會表現(xiàn)出嚴(yán)重的加速衰老。下列敘述錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/13 15:0:3組卷:66引用:5難度:0.7 -
2.我國科學(xué)工作者相繼完成了人類、水稻等生物的基因組測定,基因組測定是測定基因組全部DNA序列。其中人體有46條染色體,二倍體水稻有24條染色體,下列敘述正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/20 2:30:1組卷:36引用:5難度:0.7 -
3.我國是名副其實的發(fā)酵大國,發(fā)酵工程在食品工業(yè)、醫(yī)藥工業(yè)及農(nóng)牧業(yè)等許多領(lǐng)域得到了廣泛的應(yīng)用。下列相關(guān)敘述錯誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/18 14:0:2組卷:29引用:5難度:0.7
把好題分享給你的好友吧~~