21世紀是基因的時代,趨利避害地解碼DNA是科學家的“天職”。為提高豬肉的品質,研究人員找到肌生成抑制蛋白基因,利用基因敲除技術將豬的肌生成抑制蛋白基因敲除,從而得到了高骨骼肌含量的克隆豬。請分析回答下列問題:
(1)基因敲除技術就是將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點,以定點修飾改造染色體上某一基因。相比于傳統(tǒng)基因工程,基因敲除技術的優(yōu)點是 克服了傳統(tǒng)轉基因技術的盲目性和隨機性克服了傳統(tǒng)轉基因技術的盲目性和隨機性。
(2)將外源基因整合到靶細胞需要先構建載體,需要 限制性核酸內切酶和DNA連接限制性核酸內切酶和DNA連接酶。
(3)培養(yǎng)豬胚胎干細胞需要滿足以下條件,如95%空氣和5%的二氧化碳,其中二氧化碳的主要作用是 維持培養(yǎng)液的PH維持培養(yǎng)液的PH。胚胎干細胞可以來源于囊胚的 內細胞團內細胞團。為了快速擴大基因敲除豬的種群,除進行有性生殖外,還可以采取 胚胎分割移植胚胎分割移植、細胞核移植等無性繁殖技術。
(4)若要證明肌生成抑制蛋白基因敲除后確實改變了豬的表現(xiàn)型,實驗思路是:給基因敲除豬導入 肌生成抑制蛋白基因肌生成抑制蛋白基因,養(yǎng)殖一段時間后觀察 豬骨骼肌的生長情況豬骨骼肌的生長情況。
【答案】克服了傳統(tǒng)轉基因技術的盲目性和隨機性;限制性核酸內切酶和DNA連接;維持培養(yǎng)液的PH;內細胞團;胚胎分割移植;肌生成抑制蛋白基因;豬骨骼肌的生長情況
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:31引用:1難度:0.6
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1.學習以下材料,回答(1)~(4)題。
利用抑制性tRNA進行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子(UAA、UAG或UGA),從而使肽鏈合成提前終止,造成蛋白質的功能改變,引發(fā)相關疾病。約有10%~15%的人類基因相關遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?;虻腸DNA序列或是有治療價值的基因(如CRISPR-Cas9相關的基因編輯工具)通過一定的方式導入人體靶細胞內,達到替代或修復缺陷基因、治療疾病的目的。導入基因插入位置不當、過高或過低表達,都可能會導致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達,但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA(sup-tRNA)由天然tRNA改造而來,它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子,使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進行翻譯,獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因,是相關基因發(fā)生無義突變,產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體(圖1),以及針對該無義突變設計的sup-tRNA表達載體(產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr),將其導入細胞進行研究,發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較,sup--tRNA的作用更加顯著(圖2);進一步利用重組腺相關病毒作為載體將sup-tRNA導入患病小鼠模型中,實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存,實現(xiàn)對該病癥的有效治療,其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看,G418在促進跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機,而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一,且不會影響內源tRNA穩(wěn)態(tài),所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性,因而在未來基因突變引起的疾病相關治療中具有非常大的應用前景。
(1)侵染時,作為載體的重組腺相關病毒與靶細胞膜上的
(2)除了引入的氨基酸較為單一,不影響內源tRNA穩(wěn)態(tài),我們還可推斷,用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處
(3)研究者構建mldua突變基因和Flag基因融合的載體,目的是通過檢測
(4)有文獻報道,已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設計獨特的治療策略,這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應用價值。發(fā)布:2025/1/3 8:0:1組卷:27引用:1難度:0.6 -
2.人類基因組計劃測定了人體的24條染色體,這24條染色體是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/12/31 0:30:1組卷:112引用:7難度:0.7 -
3.幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分,自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質酶催化幾丁質水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入沒有抗性的植物體內,可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質酶基因而建立cDNA文庫的過程。
(1)圖示以mRNA為材料通過
(2)與選用老葉相比,選用嫩葉更容易提取到mRNA,原因是
(3)將從cDNA文庫中獲得的幾丁質酶基因和質粒載體用發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:5引用:1難度:0.7
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