二十碳五烯酸（EPA）能促進(jìn)體內(nèi)飽和脂肪酸代謝，是人體自身不能直接從頭合成但又不可缺少的營養(yǎng)物質(zhì)。獲取EPA產(chǎn)品的主要途徑是從魚油等海洋漁業(yè)資源中提取。研究人員利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)從海洋細(xì)菌中提取了EPA合成途徑的關(guān)鍵基因pfaB，并將其導(dǎo)入酵母菌內(nèi)，通過酵母菌發(fā)酵生產(chǎn)EPA，相關(guān)過程如圖所示，請回答下列問題：
（1）PCR技術(shù)遵循的基本原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制，在第 三三輪循環(huán)產(chǎn)物中開始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長的DNA片段（pfaB基因）。
（2）利用PCR擴(kuò)增pfaB基因時，需將溫度上升到90℃后再降溫至50℃，其目的是 使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對原則結(jié)合使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對原則結(jié)合。
（3）表達(dá)載體含有啟動子，啟動子是指 位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。
（4）將pfaB-pPIC9表達(dá)載體導(dǎo)入酵母菌前，需先將表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌并進(jìn)行篩選，篩選時培養(yǎng)基中應(yīng)加入 氨芐青霉素氨芐青霉素，再將含有表達(dá)載體的大腸桿菌與酵母菌置于電轉(zhuǎn)杯中，通過電激將大腸桿菌導(dǎo)入酵母菌，該表達(dá)載體在酵母菌中不會隨著酵母菌繁殖而丟失的原因是 表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點，能在酵母菌中復(fù)制表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點，能在酵母菌中復(fù)制。
【考點】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】DNA半保留復(fù)制；三；使pfaB基因雙鏈解旋為單鏈后，便于引物與模板鏈通過堿基互補(bǔ)配對原則結(jié)合；位于基因首端的一段特殊的DNA序列，是RNA聚合酶識別及結(jié)合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA；氨芐青霉素；表達(dá)載體上含有真核生物復(fù)制原點，能在酵母菌中復(fù)制
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/7 8:0:9組卷：0引用：1難度：0.6
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是（ ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：7引用：2難度：0.6 -
2．科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術(shù)屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因為這種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
C．人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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