為探究M基因的功能,科研人員將克隆得到的M基因導入擬南芥植株(自交繁殖),流程如下圖所示。回答下列問題:
(1)研究人員獲取了M基因的mRNA后,通過[a]逆轉錄逆轉錄(填名稱)過程獲得了M基因;然后通過[b]PCRPCR技術對其進行擴增。
(2)過程c獲得重組質粒,需要使用的工具酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。
(3)為獲得轉基因植物,本實驗采用 農(nóng)桿菌轉化農(nóng)桿菌轉化法將重組質粒導入擬南芥,主要過程如下:
①過程d:將重組質粒導入農(nóng)桿菌,得到含重組質粒的農(nóng)桿菌菌液。
②過程e:在擬南芥植株產(chǎn)生大量花序時,將其花表面部分在農(nóng)桿菌懸浮液中浸泡20~30s,3~4周后得到轉化擬南芥植株的種子T。浸泡之前,需先剪去已經(jīng)長成的角果(這些角果將來可發(fā)育成種子),原因是 已受精的角果將來結的種子是非轉基因已受精的角果將來結的種子是非轉基因。
③將收獲的擬南芥T。種子,播種在含有 卡那霉素卡那霉素的培養(yǎng)基上,能的康生長的幼苗含有M基因。
(4)若采用上述方法獲得的擬南芥細胞中只有一條DNA上含有M基因,則要進一步獲得M基因穩(wěn)定的轉基因擬南芥植株,下一步操作是 自交自交。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】逆轉錄;PCR;限制酶和DNA連接酶;農(nóng)桿菌轉化;已受精的角果將來結的種子是非轉基因;卡那霉素;自交
【解答】
【點評】
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