受到放射性污染的核廢水一旦排放入海，將對全球生態(tài)環(huán)境造成重大影響。某小組從耐輻射奇球菌中克隆出抗脅迫調(diào)節(jié)基因（pprⅠ基因），研究轉(zhuǎn)pprⅠ基因油菜對放射性污染物133Cs（銫）的吸收能力，結(jié)果如表?；卮鹣铝懈黝}：
| 133Cs濃度（mmol?kg-1） | 非轉(zhuǎn)基因 | 轉(zhuǎn)基因 | ||
| 地上部分含量（mg?g-1） | 根系含量（mg?g-1） | 地.上部分含量（mg?g-1） | 根系含量（mg?g-1） | |
| 0.5 | 1.39 | 1.73 | 1.24 | 2.11 |
| 1.0 | 2.79 | 4.42 | 2.37 | 4.59 |
| 5.0 | 6.30 | 6.37 | 4.58 | 9.69 |
| 10 | 8.77 | 10.02 | 7.55 | 12.54 |
加熱到90-95℃（高溫）
加熱到90-95℃（高溫）
的方式使模板DNA解旋為單鏈。（2）通常采用
限制酶和DNA連接酶
限制酶和DNA連接酶
（酶）將pprⅠ基因與Ti質(zhì)粒構(gòu)建成基因表達(dá)載體。為檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體DNA上，可采用 DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)，以 放射性同位素標(biāo)記目的基因
放射性同位素標(biāo)記目的基因
為探針進(jìn)行雜交。利用分子雜交技術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)，某些受體植物細(xì)胞中的pprⅠ基因無法轉(zhuǎn)錄，其原因最可能是 pprⅠ基因在Ti質(zhì)粒上的插入位點(diǎn)不在啟動子和終止子之間
pprⅠ基因在Ti質(zhì)粒上的插入位點(diǎn)不在啟動子和終止子之間
。（3）由表可知，對133Cs污染的土壤進(jìn)行生物修復(fù)時(shí)，應(yīng)優(yōu)先選擇轉(zhuǎn)pprⅠ基因油菜，其原因在于
轉(zhuǎn)基因油菜整株植物（地上部分和根系）中的133Cs吸收量大于非轉(zhuǎn)基因油菜
轉(zhuǎn)基因油菜整株植物（地上部分和根系）中的133Cs吸收量大于非轉(zhuǎn)基因油菜
。在后續(xù)處理中，應(yīng)加強(qiáng)對轉(zhuǎn)基因油菜 根系
根系
（填“地上部分”或“根系“）的處理，這是因?yàn)?轉(zhuǎn)基因油菜的根系中133Cs吸收量大于地上部分
轉(zhuǎn)基因油菜的根系中133Cs吸收量大于地上部分
。【考點(diǎn)】基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用．
【答案】加熱到90-95℃（高溫）；限制酶和DNA連接酶；DNA分子雜交；放射性同位素標(biāo)記目的基因；pprⅠ基因在Ti質(zhì)粒上的插入位點(diǎn)不在啟動子和終止子之間；轉(zhuǎn)基因油菜整株植物（地上部分和根系）中的133Cs吸收量大于非轉(zhuǎn)基因油菜；根系；轉(zhuǎn)基因油菜的根系中133Cs吸收量大于地上部分
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：3難度：0.7
相似題
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1．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個(gè)堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正常基因的cDNA序列或是有治療價(jià)值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過高或過低表達(dá)，都可能會導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實(shí)現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強(qiáng)烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點(diǎn)時(shí)不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計(jì)的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實(shí)驗(yàn)顯示能夠降低黏多糖過度積存，實(shí)現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進(jìn)跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)翻譯時(shí)引入的氨基酸較為隨機(jī)，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個(gè)體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時(shí)，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補(bǔ)DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點(diǎn)繼續(xù)向后翻譯。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無義突變位點(diǎn)的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報(bào)道，已在近1000個(gè)不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個(gè)無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計(jì)獨(dú)特的治療策略，這將是一項(xiàng)耗費(fèi)驚人的項(xiàng)目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價(jià)值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：26引用：1難度：0.6 -
2．人類基因組計(jì)劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致將其直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中不能復(fù)制和表達(dá)。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達(dá)載體，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
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