圖甲中的三個(gè)DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列與切割位點(diǎn)，圖乙為某種基因表達(dá)載體示意圖（載體上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切點(diǎn)是唯一的）。利用大腸桿菌作為工程菌生產(chǎn)人胰島素時(shí)，需用到圖乙所示質(zhì)粒以及圖甲所示的有關(guān)酶。請回答下列問題：
（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有①②③④①②③④（多選題，填序號(hào)）。
①能自我復(fù)制 ②具有標(biāo)記基因 ③能啟動(dòng)外源目的基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯 ④含有多個(gè)酶切位點(diǎn)
（2）可以從下列哪些人體細(xì)胞中獲取生產(chǎn)人胰島素的目的基因①②③①②③（多選題，填序號(hào)）。
①消化道黏膜上皮細(xì)胞 ②胰島A細(xì)胞 ③胰島B細(xì)胞 ④成熟紅細(xì)胞
（3）經(jīng)BamHⅠ酶切割得到的目的基因能能（填“能”或“不能”）與圖乙所示質(zhì)粒被Sau3AⅠ酶切后的產(chǎn)物連接，理由是Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同。
（4）將人胰島素基因與圖乙所示質(zhì)粒所拼接的重組質(zhì)粒導(dǎo)入到大腸桿菌的常用方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，檢測目的基因是否導(dǎo)入成功，可用含有四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基進(jìn)行初步篩選。目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是合成胰島素合成胰島素。
（5）已知圖乙所示質(zhì)粒經(jīng)EcoRⅠ和Sau3AⅠ聯(lián)合酶切后形成2.0kb和4.2kb（lkb=1000對堿基）兩種DNA片段。若將0.8kb的單個(gè)基因插在質(zhì)粒的Sau3AⅠ位點(diǎn)處，所形成的重組質(zhì)粒用EcoRⅠ和Sau3AⅠ聯(lián)合酶切后，能形成的DNA片段長度分別為4.2kb、0.8kb、2kb4.2kb、0.8kb、2kb。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】①②③④；①②③；能；Sau3AⅠ與BamHⅠ切割后形成的黏性末端相同；農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；四環(huán)素；合成胰島素；4.2kb、0.8kb、2kb
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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