重組人胰島素是世界上第一個基因工程藥物，它的使用造福了億萬糖尿病患者。興趣小組探究工程菌的構建，實驗所用質粒載體如圖所示，其中LacZ基因的表達產(chǎn)物能將無色反應物X-gal水解，從而使菌落呈藍色，否則菌落呈現(xiàn)白色；Ampr基因的表達產(chǎn)物分泌到細胞外發(fā)揮作用。本實驗所用的受體大腸桿菌無LacZ基因。
（1）將表達載體轉入大腸桿菌細胞最常用的轉化方法是：一般先用 Ca2+Ca2+處理細胞，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達載體導入其中。
（2）雙重篩選培養(yǎng)基：培養(yǎng)基中加入 氨芐青霉素氨芐青霉素用以篩選出導入了質粒載體的受體菌（轉化子），培養(yǎng)基中加入 X-galX-gal用以鑒別出含重組質粒的受體菌（重組子）。重組子的菌落顏色是 白色白色，原因是 重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色（答出1點即可）。
（3）某些重組子不能合成胰島素，可能的原因是 兩個質?？赡芊聪蜻B接破壞LacZ基因結構；目的基因與質粒反向連接兩個質?？赡芊聪蜻B接破壞LacZ基因結構；目的基因與質粒反向連接（答出1點即可）。
（4）長時間培養(yǎng)后，培養(yǎng)基中轉化子形成的菌落周圍出現(xiàn)了一些非轉化子形成的較小菌落，這些非轉化子菌落形成的原因是 培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】Ca2+；一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；氨芐青霉素；X-gal；白色；重組子因LacZ基因被破壞，無法合成水解X-gal的酶，菌落呈白色；兩個質粒可能反向連接破壞LacZ基因結構；目的基因與質粒反向連接；培養(yǎng)時間過長，Ampr基因（抗性基因）的表達產(chǎn)物分泌積累，使周圍培養(yǎng)基氨芐青霉素失效
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：4引用：1難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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