蛋白質(zhì)提取、分離在分子生物學研究中具有重要意義。
(1)蛋白質(zhì)提取和分離的步驟一般分為樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。
(2)提取血紅蛋白時,選用豬血,而不選用雞血。理由是哺乳動物紅細胞中沒有細胞核,減少干擾哺乳動物紅細胞中沒有細胞核,減少干擾。
(3)實驗前采取新鮮的豬血,要切記在采血容器中預先加入檸檬酸鈉,目的是防止血液凝固防止血液凝固。若要從紅細胞中提取血紅蛋白,則要對獲得的紅細胞進行洗滌洗滌、血紅蛋白釋放血紅蛋白釋放和分離血紅蛋白溶液、透析,才能獲得含雜質(zhì)較少的血紅蛋白溶液。
(4)通過凝膠色譜凝膠色譜法將樣品進一步純化,經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳方法進行純度鑒定。
(5)在凝膠色譜法制作過程中,裝填凝膠柱時,不得有氣泡存在,原因是氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果。
【考點】蛋白質(zhì)的結構和功能的綜合.
【答案】樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定;哺乳動物紅細胞中沒有細胞核,減少干擾;防止血液凝固;洗滌;血紅蛋白釋放;凝膠色譜;SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳;氣泡會攪亂洗脫液中蛋白質(zhì)的洗脫次序,降低分離效果
【解答】
【點評】
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