科學家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄,使番茄的耐寒能力大大提高,可以在相對寒冷的環(huán)境中生長。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四種限制酶切割位點,如圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampr為抗氨芐青霉素基因),其中①~④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關步驟,Ⅰ、Ⅱ表示相關結構或細胞。請據(jù)圖作答:
(1)在構建基因表達載體時,可用一種或者多種限制酶進行切割。為了避免目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生任意連接,在此實例中,應該選用限制酶 PstⅠPstⅠ、SmaⅠSmaⅠ分別對 魚抗凍蛋白基因的DNA、魚抗凍蛋白基因的DNA、、質(zhì)粒質(zhì)粒進行切割,切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為 44種、22種。
(2)培養(yǎng)基中的氨芐青霉素會抑制番茄愈傷組織細胞的生長,要利用該培養(yǎng)基篩選已導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄細胞,應使基因表達載體I中含有 抗氨芐青霉素基因(ampr)抗氨芐青霉素基因(ampr)作為標記基因。
(3)利用組織培養(yǎng)技術將導入含魚的抗凍蛋白基因的番茄組織細胞培育成植株。圖中③、④依次表示組織培養(yǎng)過程中番茄組織細胞的 脫分化、再分化脫分化、再分化過程。
【考點】植物的組織培養(yǎng).
【答案】PstⅠ;SmaⅠ;魚抗凍蛋白基因的DNA、;質(zhì)粒;4;2;抗氨芐青霉素基因(ampr);脫分化、再分化
【解答】
【點評】
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