基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。圖1為限制酶EcoRⅠ的識別序列,圖2表示目的基因及限制酶切點,圖3表示目的基因上的DNA片段,圖4表示質(zhì)粒。請回答下列問題:
(1)若用圖1所示的限制酶EcoRⅠ切割外源DNA,就其特異性而言,切開的是鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸之間相連的化學(xué)鍵。
(2)圖3為目的基因中的某一片段,下列有關(guān)敘述正確的是BDBD。
A.若圖中的ACT能決定一個氨基酸,則ACT可稱為一個密碼子
B.DNA聚合酶和DNA連接酶都可作用于②處,解旋酶作用于①處
C.若只用這個片段中的3個堿基對,排列出的DNA片段有64種
D.就游離的磷酸基而言,該片段與重組質(zhì)粒相比多了2個游離的磷酸基
(3)若利用PCR技術(shù)增加目的基因的數(shù)量,由圖2可知,A、B、C、D四種單鏈DNA片段中應(yīng)選取B和CB和C作為引物(DNA復(fù)制子鏈的延伸方向5′→3′)。該DNA分子在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)后會產(chǎn)生等長的目的基因片段88個。
(4)為了使目的基因和質(zhì)粒定向連接并且有利于受體細(xì)胞的篩選,提高重組效率,應(yīng)該選擇的限制酶是PstⅠ、EcoRⅠPstⅠ、EcoRⅠ。如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ同時對質(zhì)粒進(jìn)行切割,假設(shè)同時只有任意兩個位點被切斷且每次機(jī)會相等,則形成含有完整抗四環(huán)素基因的DNA片段有11種。
(5)如果大腸桿菌是受體細(xì)胞,則其體內(nèi)應(yīng)不含抗四環(huán)素基因抗四環(huán)素基因基因,以利于篩選出含重組質(zhì)粒的受體菌。目的基因能在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)出相同的蛋白質(zhì),其遺傳學(xué)基礎(chǔ)是各種生物共用一套密碼子各種生物共用一套密碼子。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】鳥嘌呤脫氧核苷酸和腺嘌呤脫氧核苷酸;BD;B和C;8;PstⅠ、EcoRⅠ;1;抗四環(huán)素基因;各種生物共用一套密碼子
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:128引用:6難度:0.3
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