2018年第一例基因編輯的嬰兒的誕生，引起中國醫(yī)學(xué)與科研界的普遍震驚與強烈譴責(zé)。這一嬰兒的基因編輯利用 CRISPR/as9系統(tǒng)基因編輯技術(shù)，該系統(tǒng)主要包含引導(dǎo)RNA和Cas9內(nèi)切酶兩個部分，引導(dǎo)RNA能識別并結(jié)合特定的DNA序列，從而引導(dǎo)Cas9內(nèi)切酶結(jié)合到相應(yīng)位置并剪切DNA，最終實現(xiàn)對靶基因序列的編輯。CRISPR/Ca9系統(tǒng)基因修飾技術(shù)流程如圖示，請回答下列問題：
（1）Cas9內(nèi)切酶在自然界原核生物體中的作用是 識別外源性入侵的核酸序列，并對其進(jìn)行特異性切割識別外源性入侵的核酸序列，并對其進(jìn)行特異性切割。
（2）圖中進(jìn)行基因修飾過程中，除圖中所示工具酶外，還用到 DNA連接酶DNA連接酶，該工具酶 不能不能（“能”或“不能”）特異性識別DNA堿基序列。
（3）將經(jīng)過修飾的基因組導(dǎo)入斑馬魚、細(xì)菌細(xì)胞的技術(shù)方法分別是 顯微注射顯微注射法、Ca2+處理法等。細(xì)菌細(xì)胞作為受體的原因是 細(xì)菌繁殖快，多為單細(xì)胞生物，遺傳物質(zhì)較少細(xì)菌繁殖快，多為單細(xì)胞生物，遺傳物質(zhì)較少。
（4）將經(jīng)過修飾的基因組成功導(dǎo)入人體細(xì)胞后，還需經(jīng)過 動物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植動物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植技術(shù)，才能獲得基因編輯嬰兒，但基因編輯嬰兒的誕生被世界眾多科學(xué)家所譴責(zé)。若你是一名持譴責(zé)態(tài)度的科學(xué)家，請說明你譴責(zé)的理由是：違背人類倫理道德；基因編輯具有一定的不確定性，這給被改編基因的人埋下難以預(yù)計的潛在后果；基因編輯后，不能完全達(dá)到目的；將基因修飾技術(shù)施于人，會導(dǎo)致人類基因的改變違背人類倫理道德；基因編輯具有一定的不確定性，這給被改編基因的人埋下難以預(yù)計的潛在后果；基因編輯后，不能完全達(dá)到目的；將基因修飾技術(shù)施于人，會導(dǎo)致人類基因的改變（至少兩點）。
【答案】識別外源性入侵的核酸序列，并對其進(jìn)行特異性切割；DNA連接酶；不能；顯微注射；細(xì)菌繁殖快，多為單細(xì)胞生物，遺傳物質(zhì)較少；動物細(xì)胞培養(yǎng)、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植；違背人類倫理道德；基因編輯具有一定的不確定性，這給被改編基因的人埋下難以預(yù)計的潛在后果；基因編輯后，不能完全達(dá)到目的；將基因修飾技術(shù)施于人，會導(dǎo)致人類基因的改變
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：1難度：0.6
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1．人類基因組計劃測定了人體的24條染色體，這24條染色體是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 0:30:1組卷：112引用：7難度：0.7 -
2．學(xué)習(xí)以下材料，回答（1）～（4）題。
利用抑制性tRNA進(jìn)行無義突變遺傳病的治療
無義突變是由于某個堿基的改變使代表某種氨基酸的密碼子突變?yōu)榻K止密碼子（UAA、UAG或UGA），從而使肽鏈合成提前終止，造成蛋白質(zhì)的功能改變，引發(fā)相關(guān)疾病。約有10%～15%的人類基因相關(guān)遺傳疾病是由無義突變引發(fā)的。常規(guī)的基因治療是將正?；虻腸DNA序列或是有治療價值的基因（如CRISPR-Cas9相關(guān)的基因編輯工具）通過一定的方式導(dǎo)入人體靶細(xì)胞內(nèi)，達(dá)到替代或修復(fù)缺陷基因、治療疾病的目的。導(dǎo)入基因插入位置不當(dāng)、過高或過低表達(dá)，都可能會導(dǎo)致副作用。盡管基因編輯可以實現(xiàn)生理水平的基因表達(dá)，但基因編輯工具引入外源蛋白可能引發(fā)強烈的免疫反應(yīng)仍然是巨大的挑戰(zhàn)。
抑制性tRNA（sup-tRNA）由天然tRNA改造而來，它的反密碼子通過堿基配對原則可以識別無義突變的終止密碼子，使得mRNA在翻譯至無義突變位點時不啟動翻譯終止而是繼續(xù)向后進(jìn)行翻譯，獲得有功能的全長蛋白。
I型黏多糖貯積癥的病因，是相關(guān)基因發(fā)生無義突變，產(chǎn)生終止密碼子UAG。研究者構(gòu)建小鼠該突變基因mldua和Flag基因融合的載體（圖1），以及針對該無義突變設(shè)計的sup-tRNA表達(dá)載體（產(chǎn)生的sup-tRNA能夠識別UAG并攜帶酪氨酸Tyr,簡寫作sup-tRNATyr），將其導(dǎo)入細(xì)胞進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)與具有相似作用的化合物G418比較，sup--tRNA的作用更加顯著（圖2）；進(jìn)一步利用重組腺相關(guān)病毒作為載體將sup-tRNA導(dǎo)入患病小鼠模型中，實驗顯示能夠降低黏多糖過度積存，實現(xiàn)對該病癥的有效治療，其療效可以持續(xù)半年以上。
從整體來看，G418在促進(jìn)跨越無義突變位點繼續(xù)翻譯時引入的氨基酸較為隨機，而sup-tRNA引入的氨基酸較為單一，且不會影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，所以sup-tRNA在個體治療中具有很高的安全性，因而在未來基因突變引起的疾病相關(guān)治療中具有非常大的應(yīng)用前景。
（1）侵染時，作為載體的重組腺相關(guān)病毒與靶細(xì)胞膜上的發(fā)生識別，引發(fā)內(nèi)吞，進(jìn)入細(xì)胞后釋放單鏈DNA作為模板，利用宿主細(xì)胞的催化合成其互補DNA鏈，再經(jīng)過過程產(chǎn)生sup-tRNA。
（2）除了引入的氨基酸較為單一，不影響內(nèi)源tRNA穩(wěn)態(tài)，我們還可推斷，用于治療的sup-tRNA在正常終止密碼子處（填“能”或“不能”）繼續(xù)往后翻譯，具有很高的安全性。
（3）研究者構(gòu)建mldua突變基因和Flag基因融合的載體，目的是通過檢測來確定是否跨越無義突變位點繼續(xù)向后翻譯。實驗結(jié)果表明，相比于化合物G418，sup-tRNA在促進(jìn)無義突變位點的翻譯方面更加有效，支持這一結(jié)論的依據(jù)是：。
（4）有文獻(xiàn)報道，已在近1000個不同的人類基因中發(fā)現(xiàn)了7500多個無義突變。常規(guī)的基因治療需要為每種疾病設(shè)計獨特的治療策略，這將是一項耗費驚人的項目。據(jù)此說明sup-tRNA的應(yīng)用價值。發(fā)布：2025/1/3 8:0:1組卷：26引用：1難度：0.6 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，自然界有些植物能產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶催化幾丁質(zhì)水解從而抵抗真菌感染。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入沒有抗性的植物體內(nèi)，可增強其抗真菌的能力。如圖表示為獲取幾丁質(zhì)酶基因而建立cDNA文庫的過程。
（1）圖示以mRNA為材料通過法獲得cDNA，該方法依據(jù)的原理是，通過這種方法獲得的基因中因缺乏和結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致將其直接導(dǎo)入受體細(xì)胞中不能復(fù)制和表達(dá)。
（2）與選用老葉相比，選用嫩葉更容易提取到mRNA，原因是，且提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（3）將從cDNA文庫中獲得的幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體用酶和DNA連接處理后連接起來，構(gòu)建基因表達(dá)載體，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：5引用：1難度：0.7
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