普通棉花中β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）表達(dá)出的3-甘露糖苷酶能催化半纖維素降解，使棉纖維長(zhǎng)度變短。為了培育長(zhǎng)絨棉，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達(dá)載體，獲得了轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉新品種，具體過(guò)程如圖所示，SmaⅠ，NotⅠ，HindⅢ和BamHⅠ為酶切位點(diǎn)，LB為T-DNA左邊界，RB為T-DNA右邊界?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）過(guò)程①中不用限制酶NotⅠ的原因是 限制酶NotI會(huì)破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒(méi)有NotI的切割位點(diǎn)限制酶NotI會(huì)破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒(méi)有NotI的切割位點(diǎn)。GhMnaA2的序列中包含內(nèi)含子等序列，可增大重組質(zhì)粒的分子量，使導(dǎo)入效率降低，請(qǐng)?zhí)岢鲆粋€(gè)解決此問(wèn)題的方案：從棉花細(xì)胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA從棉花細(xì)胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA。
（2）過(guò)程②中在培養(yǎng)基中添加 抗生素抗生素可將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來(lái)。反義表達(dá)載體T-DNA區(qū)段的 E6啟動(dòng)子和GhMnaA2基因E6啟動(dòng)子和GhMnaA2基因片段整合到棉花細(xì)胞的染色體中，并在翻譯過(guò)程中起作用。
（3）過(guò)程③中目的基因?qū)朊藁?xì)胞后，可采用 PCRPCR技術(shù)從分子水平上檢測(cè)目的基因是否插入染色體；個(gè)體水平上的檢測(cè)為 觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長(zhǎng)觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長(zhǎng)。
（4）由圖分析可知，轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉棉纖維較普通棉棉纖維長(zhǎng)的原因是 轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而抑制該基因的表達(dá)，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉的棉纖維長(zhǎng)于普通棉花轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而抑制該基因的表達(dá)，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉的棉纖維長(zhǎng)于普通棉花。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】限制酶NotI會(huì)破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒(méi)有NotI的切割位點(diǎn)；從棉花細(xì)胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA；抗生素；E6啟動(dòng)子和GhMnaA2基因；PCR；觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長(zhǎng)；轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉細(xì)胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細(xì)胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補(bǔ)配對(duì)，從而抑制該基因的表達(dá)，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長(zhǎng)絨棉的棉纖維長(zhǎng)于普通棉花
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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