全面接種新冠疫苗可有效防止新冠病毒的大規(guī)模傳染。新冠疫苗有多種類型,如滅活疫苗、重組疫苗、mRNA疫苗等。重組疫苗的研發(fā)可以利用腺病毒作為載體。請回答下列問題:
(1)新冠病毒依賴其表面的S蛋白與宿主細胞膜上ACE2受體結(jié)合而最終實現(xiàn)感染。ACE2受體的化學本質(zhì)是 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)。該結(jié)合過程體現(xiàn)了細胞膜 信息交流信息交流功能。
(2)新冠病毒是一種RNA病毒。研制疫苗時,需利用RT-PCR技術(shù)獲取S蛋白基因,該過程除逆轉(zhuǎn)錄酶外,還有 熱穩(wěn)定DNA聚合酶熱穩(wěn)定DNA聚合酶酶參與,此酶需要 Mg2+Mg2+(離子)的激活。PCR的最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要在72℃維持7min左右,其目的是 使子鏈充分延伸使子鏈充分延伸
(3)腺病毒是一種DNA病毒,基因組中的E基因與其復制有關。將其作為運載S蛋白基因的載體時,需對腺病毒進行的改造是 敲除E基因敲除E基因,以提高該種新冠疫苗的安全性。
(4)接種滅活疫苗一般需2~3次,而接種重組DNA疫苗一般只需1次,根據(jù)疫苗作用原理和人體特異性免疫反應機制分析,可能的原因是 可在人體內(nèi)持續(xù)表達S蛋白,誘導機體持續(xù)產(chǎn)生相應的抗體和記憶細胞可在人體內(nèi)持續(xù)表達S蛋白,誘導機體持續(xù)產(chǎn)生相應的抗體和記憶細胞。
(5)在基因組中敲除并整合基因,其技術(shù)流程通常如圖1所示。
①利用大腸桿菌DNA進行PCR,無需從細胞中提取DNA,可在培養(yǎng)出菌落后直接挑取菌落進行,分析其原因是 PCR變性時的高溫可使細菌細胞膜失去選擇透過性PCR變性時的高溫可使細菌細胞膜失去選擇透過性,DNA得以釋放。
②利用PCR獲得對應產(chǎn)物的關鍵是 引物引物設計。
③PCR5時需要加入的引物是 C1+B2C1+B2。
④利用電泳技術(shù)鑒定PCR產(chǎn)物,結(jié)果如圖2。其中陽性泳道使用的樣品是熒光基因M,可與待測泳道中DNA進行對比;標準泳道使用的樣品是不同已知長度(大?。┑腄NA片段,作用是 便于確定待測泳道中DNA的長度便于確定待測泳道中DNA的長度。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】蛋白質(zhì);信息交流;熱穩(wěn)定DNA聚合酶;Mg2+;使子鏈充分延伸;敲除E基因;可在人體內(nèi)持續(xù)表達S蛋白,誘導機體持續(xù)產(chǎn)生相應的抗體和記憶細胞;PCR變性時的高溫可使細菌細胞膜失去選擇透過性;引物;C1+B2;便于確定待測泳道中DNA的長度
【解答】
【點評】
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