“端穩(wěn)中國碗，裝滿中國糧”，為了培育好中國種，科研人員在基因工程育種領(lǐng)域開展了大量的研究。有研究發(fā)現(xiàn)花生細胞中的S基因在抗真菌類病害中發(fā)揮著重要作用?？蒲腥藛T提取花生細胞中S基因的mRNA，通過基因重組技術(shù)，以Ti質(zhì)粒為表達載體，導入水稻葉片外植體細胞中，使水稻獲得了對稻瘟?。ㄓ烧婢腥疽?，導致水稻減產(chǎn)）的抗性。據(jù)圖示信息回答下列問題：
（1）科學家提取花生細胞的mRNA后通過 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得其cDNA，經(jīng)PCR技術(shù)擴增S基因。通過該方法獲得的S基因與花生細胞中的S基因的DNA序列是否完全一致？不完全一致不完全一致（填“完全一致”或“不完全一致”），原因是 以花生細胞的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的cDNA不含內(nèi)含子、啟動子和終止子等非編碼序列以花生細胞的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的cDNA不含內(nèi)含子、啟動子和終止子等非編碼序列。
（2）用PCR技術(shù)擴增S基因時，需要設(shè)計引物，引物的作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。為了使目的基因能夠被限制酶切割，需要在引物的 5'端5'端（填“3'端”或“5'端”）添加限制酶識別序列。
（3）為了成功構(gòu)建重組表達載體，確保目的基因插入載體中方向正確，最好選用 XbaⅠ、HindⅢXbaⅠ、HindⅢ（填圖中限制酶）酶切割S基因的cDNA和載體。用農(nóng)桿菌侵染水稻葉片外植體，其目的是 通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進入植物細胞通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進入植物細胞。
（4）轉(zhuǎn)基因水稻是否表現(xiàn)出了抗性，需要進行個體水平的檢測，檢測的方法是 對轉(zhuǎn)基因水稻植株接種相應的真菌，觀察其是否患稻瘟病對轉(zhuǎn)基因水稻植株接種相應的真菌，觀察其是否患稻瘟病。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；不完全一致；以花生細胞的mRNA通過逆轉(zhuǎn)錄過程獲得的cDNA不含內(nèi)含子、啟動子和終止子等非編碼序列；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；5'端；XbaⅠ、HindⅢ；通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使目的基因進入植物細胞；對轉(zhuǎn)基因水稻植株接種相應的真菌，觀察其是否患稻瘟病
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/8 8:0:9組卷：19引用：2難度：0.8
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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