為評估外源基因Vgb在菊花中的穩(wěn)定性以及對生態(tài)環(huán)境的影響,研究人員在種植轉(zhuǎn)基因菊花的第二年,隨機選取轉(zhuǎn)基因菊花株系及周邊非轉(zhuǎn)基因菊花和各種雜草,提取DNA。根據(jù)Vgb設(shè)計特異性引物進行PCR擴增,電泳結(jié)果如圖。回答下列問題:
(1)將外源基因Vgb整合到菊花細(xì)胞需要先構(gòu)建基因表達載體,構(gòu)建基因表達載體時,需要使用的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。重組載體進入菊花細(xì)胞并在細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為 轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化。構(gòu)建基因表達載體時,外源基因Vgb插在啟動子的上游,則在菊花細(xì)胞中檢測不到表達產(chǎn)物,主要原因是 目的基因無法轉(zhuǎn)錄目的基因無法轉(zhuǎn)錄。
(2)設(shè)計引物是PCR技術(shù)的關(guān)鍵步驟之一、根據(jù)Vgb設(shè)計特異性引物進行PCR擴增,某同學(xué)設(shè)計的一組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)為,此引物設(shè)計 不合理不合理(填“合理”或“不合理”),說明理由:引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效。
(3)設(shè)置空白對照的目的是 排除實驗操作、試劑污染等對結(jié)果的影響排除實驗操作、試劑污染等對結(jié)果的影響。對于外源基因Vgb在菊花中的穩(wěn)定性以及對周邊植物的影響方面,圖中實驗結(jié)果表明 2年內(nèi)Vgb基因在菊花細(xì)胞中穩(wěn)定存在,且未發(fā)生向周邊植物的擴散2年內(nèi)Vgb基因在菊花細(xì)胞中穩(wěn)定存在,且未發(fā)生向周邊植物的擴散。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制酶和DNA連接酶;轉(zhuǎn)化;目的基因無法轉(zhuǎn)錄;不合理;引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效;排除實驗操作、試劑污染等對結(jié)果的影響;2年內(nèi)Vgb基因在菊花細(xì)胞中穩(wěn)定存在,且未發(fā)生向周邊植物的擴散
【解答】
【點評】
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