小白鼠因其具有容易飼養(yǎng),繁殖率高,遺傳上有較高的純合度,代謝類型、生理病理特征與人類接近,全基因序列和人類高度相似,染色體數(shù)與人類非常接近等系列特征而成為人類實驗研究的重要對象。據(jù)統(tǒng)計,全球每年有超過1億的小白鼠被用來當(dāng)作實驗樣本,它們可以說為人類醫(yī)學(xué)作出了巨大的貢獻(xiàn)。如圖1是科研人員利用小白鼠單倍體ES細(xì)胞(只有一個染色體組),成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠的主要技術(shù)流程,請分析回答下列問題:
注:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點:Amp′是氨芐青霉素抗性基因,Neo′是G418抗性基因。
(1)利用PCR技術(shù)可以獲取和擴(kuò)增目的基因。在PCR反應(yīng)體系中,除含有緩沖液、模板DNA、4種脫氧核苷酸、引物外,還應(yīng)含有 Taq酶Taq酶;引物應(yīng)選用圖2中的 B和CB和C(填圖中字母,字母表示引物)。
(2)已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞,而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞。結(jié)合圖中推測,過程①選用的2種限制酶是 Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ(填圖中的編號),③處的培養(yǎng)液中應(yīng)添加 G418G418(填“氨芐青霉素”或“G418”)。
(3)圖中過程④的本質(zhì)相當(dāng)于動物的受精作用。在胚胎工程操作中,常以觀察到 兩個極體兩個極體作為受精的標(biāo)志。圖中的桑葚胚需經(jīng) 胚胎移植胚胎移植技術(shù)才能形成轉(zhuǎn)基因小鼠,若需獲得更多遺傳性狀相同的轉(zhuǎn)基因小鼠,可在該操作前對桑葚胚進(jìn)行 胚胎分割胚胎分割,該技術(shù)所需要的主要儀器設(shè)備為 實體顯微鏡和顯微操作儀實體顯微鏡和顯微操作儀。
【答案】Taq酶;B和C;Ⅰ和Ⅱ;G418;兩個極體;胚胎移植;胚胎分割;實體顯微鏡和顯微操作儀
【解答】
【點評】
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