基因工程又稱基因拼接技術(shù)和DNA重組技術(shù),是以分子遺傳學(xué)為理論基礎(chǔ),以分子生物學(xué)和微生物學(xué)的現(xiàn)代方法為手段。如圖是基因工程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:
(1)從基因文庫中提取的目的基因通過PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),所用的酶與細(xì)胞內(nèi)同類酶的差異在于該酶耐高溫耐高溫。
(2)進(jìn)行①過程時(shí),需用限制限制酶切開載體以插入目的基因。若要使目的基因在受體細(xì)胞中表達(dá),需要通過表達(dá)載體而不能直接將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,原因是目的基因無復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子目的基因無表達(dá)所需的終止子目的基因無復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子目的基因無表達(dá)所需的終止子(答出兩點(diǎn)即可)
(3)若圖中宿主細(xì)胞為大腸桿菌,一般情況下②過程不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,原因是未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力弱未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力弱;已轉(zhuǎn)化的宿主細(xì)胞(大腸桿菌)指的是已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞
(4)真核生物基因(目的基因)在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)時(shí),表達(dá)出的蛋白質(zhì)可能會(huì)被降解。為防止蛋白質(zhì)被降解,在實(shí)驗(yàn)中應(yīng)選用蛋白酶缺陷型蛋白酶缺陷型的大腸桿菌作為受體細(xì)胞,在蛋白質(zhì)純化的過程中應(yīng)添加蛋白酶蛋白酶的抑制劑。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】耐高溫;限制;目的基因無復(fù)制原點(diǎn)、目的基因無表達(dá)所需啟動(dòng)子目的基因無表達(dá)所需的終止子;未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒(外源DNA)的能力弱;已導(dǎo)入目的基因并且目的基因能穩(wěn)定遺傳和表達(dá)的細(xì)胞;蛋白酶缺陷型;蛋白酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/11/21 7:0:1組卷:46引用:7難度:0.7
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