研究表明，服用α-干擾素在慢性乙肝、丙肝及部分腫瘤的治療中有一定療效。人參是一種名貴藥材，具有較好的滋補(bǔ)作用。限制酶的發(fā)現(xiàn)為DNA的切割和功能基因的獲得創(chuàng)造了條件。限制酶Sau3AⅠ、EcoRⅠ、BamHⅠ的識別序列及切割位點(diǎn)分別為↓GATC、G↓AATTC、C↓GATCC。含干擾素基因的DNA片段如圖1所示，圖2為科研人員制備能合成干擾素的人參愈傷組織細(xì)胞的流程圖，①～④表示相關(guān)的操作。請回答下列問題：
（1）結(jié)合上圖，在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，為克服目的基因和農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的自身環(huán)化以及目的基因與質(zhì)粒的任意連接等，應(yīng)選擇用限制酶 EcoRⅠ和BamHⅠEcoRⅠ和BamHⅠ處理含某目的基因的DNA和質(zhì)粒。
（2）DNA連接酶催化目的基因片段與質(zhì)粒載體片段之間形成的化學(xué)鍵是 磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵。
（3）圖2操作①常利用PCR技術(shù)獲取和擴(kuò)增干擾素基因，除含有干擾素基因的DNA片段之外，該過程需要提供 4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）以及與干擾素基因兩端兩條模板鏈結(jié)合的兩種引物。設(shè)計(jì)引物時(shí)，為了保證目的基因與質(zhì)粒順利連接，防止出現(xiàn)自身環(huán)化連接，需要在兩種引物的一端分別加上EcoRⅠ和BamHⅠ的識別序列 GAATTC和CGATCCGAATTC和CGATCC。
（4）圖2步驟②除EcoRⅠ、BamHⅠ兩種酶外，還需要用 DNA連接DNA連接酶。構(gòu)建的基因表達(dá)載體除含有目的基因片段以外，還必須有 啟動子和終止子啟動子和終止子，以保證干擾素基因能在人參愈傷組織細(xì)胞中穩(wěn)定存在和表達(dá)。同時(shí)，還應(yīng)含有標(biāo)記基因以便于 篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞。
（5）圖2操作④常用 抗原—抗體雜交抗原—抗體雜交技術(shù)檢測干擾素基因是否成功表達(dá)出干擾素。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】EcoRⅠ和BamHⅠ；磷酸二酯鍵；4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（dNTP和Taq酶）；GAATTC和CGATCC；DNA連接；啟動子和終止子；篩選含有重組DNA分子的受體細(xì)胞；抗原—抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/8/6 8:0:9組卷：28引用：3難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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