苯丙酮尿癥是由P基因突變引起的,科研人員將正常P基因定點(diǎn)整合到P基因突變的小鼠胚胎于細(xì)胞的染色體DNA上,替換掉突變基因,治愈了老鼠的苯丙酮尿癥(如圖)。該技術(shù)有望在人類(lèi)疾病的治療上取得預(yù)期效果。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)構(gòu)建含P基因的重組載體時(shí),常用的工具酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶;已知含neor的細(xì)胞具有G418(一種抗生素)的抗性,可見(jiàn)重組載體中的neor是 標(biāo)記基因標(biāo)記基因。
(2)常用 顯微注射顯微注射法將重組載體導(dǎo)入小鼠胚胎干細(xì)胞,將重組載體導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞的原因是胚胎干細(xì)胞能大量增殖,且 具有發(fā)育的全能性具有發(fā)育的全能性。
(3)若從小鼠的早期胚胎中獲取胚胎干細(xì)胞,可以從 桑葚胚或囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)桑葚胚或囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)中獲取;要使貼壁生長(zhǎng)的胚胎干細(xì)胞從瓶壁上脫落,可用 胰蛋白酶或膠原蛋白胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理。
(4)利用neor等篩選出胚胎干細(xì)胞,將篩選出的胚胎干細(xì)胞培育成小鼠,還需通過(guò)檢測(cè)小鼠體內(nèi) 苯丙酮酸苯丙酮酸的含量,進(jìn)行個(gè)體生物學(xué)水平的檢測(cè)。
【考點(diǎn)】干細(xì)胞的培養(yǎng)及其應(yīng)用.
【答案】限制酶和DNA連接酶;標(biāo)記基因;顯微注射;具有發(fā)育的全能性;桑葚胚或囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán);胰蛋白酶或膠原蛋白;苯丙酮酸
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:23引用:4難度:0.7
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發(fā)布:2024/12/27 8:0:2組卷:11引用:4難度:0.7 -
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