下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
限制酶 | BamHⅠ | BclⅠ | Sau3AⅠ | HindⅢ |
識(shí)別序列及切割位點(diǎn) |
(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用
BclⅠ和HindⅢ
BclⅠ和HindⅢ
兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò) DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入經(jīng) 氯化鈣
氯化鈣
處理過(guò)的 感受
感受
態(tài)的大腸桿菌中。(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
。平板上長(zhǎng)出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中的 引物甲和引物丙
引物甲和引物丙
。(3)若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接,連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為 ,對(duì)于該部位,這兩種酶
都不能
都不能
(填“都能”、“都不能”或“只有一種能”)切開(kāi)。(4)若用Sau3AI切圖1質(zhì)粒最多可能獲得
7
7
種大小不同的DNA片段。【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】BclⅠ和HindⅢ;DNA連接;氯化鈣;感受;四環(huán)素;引物甲和引物丙;;都不能;7
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:6引用:1難度:0.6
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