家禽飼料中富含纖維素,但家禽消化道中缺少降解纖維素的酶,阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員從枯草芽孢桿菌中分離出編碼纖維素酶的W基因,并借助圖1所示的質(zhì)粒載體導入到乳酸桿菌體內(nèi),以提高添加乳酸桿菌飼料的利用率,節(jié)省成本。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段。回答下列問題:
(1)啟動子是一段有特殊序列結構的DNA片段,是 RNA聚合酶RNA聚合酶識別和結合的部位。多數(shù)啟動子具有物種特異性,為滿足應用需要,在圖1質(zhì)粒中插入W基因的上游應選擇 乳酸桿菌乳酸桿菌(填“枯草芽孢桿菌”或“乳酸桿菌”)的啟動子。
(2)分析上述兩圖可知,應使用限制酶 EcoRⅠ和HindⅢEcoRⅠ和HindⅢ切割質(zhì)粒和含W基因的DNA片段,以獲得W基因能正確連接的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒導入到乳酸桿菌后,使用含抗生素 氨芐青霉素氨芐青霉素(填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)的培養(yǎng)基篩選,以得到成功導入W基因的乳酸桿菌。
(3)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為甲、乙、丙三組,其中甲組接種乳酸桿菌,乙組接種導入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌,丙組接種導入普通質(zhì)粒的乳酸桿菌。相同條件下培養(yǎng)一段時間,發(fā)現(xiàn)甲、丙兩組培養(yǎng)基中纖維素的含量無變化,而乙組含量下降,試從分子水平簡要闡述出現(xiàn)上述結果的原因:W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶。
(4)人們也可以通過蛋白質(zhì)工程獲得作物新品種,該工程的起點是 預期蛋白質(zhì)的功能預期蛋白質(zhì)的功能,最終通過改造或合成基因來完成。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合酶;乳酸桿菌;EcoRⅠ和HindⅢ;氨芐青霉素;W基因在乳酸桿菌中成功表達出分解纖維素的酶;預期蛋白質(zhì)的功能
【解答】
【點評】
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