干擾素在人體中是由免疫細(xì)胞合成并分泌的一種糖蛋白,幾乎能抵御所有病毒引起的感染,傳統(tǒng)生產(chǎn)方法成本高、產(chǎn)量低,獲得的干擾素在體外不易保存。家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力,將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥.請(qǐng)回答相關(guān)問題:
(1)利用基因工程生產(chǎn)干擾素,過程是:
①?gòu)慕】等梭w的外周靜脈血分離能合成干擾素的 免疫免疫細(xì)胞,從中提取mRNA,經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄法獲取目的基因。
②用 限制限制酶處理載體和目的基因后,DNA連接酶處理,形成基因表達(dá)載體。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自干擾素基因的片段正確插入表達(dá)載體的 啟動(dòng)子啟動(dòng)子和 終止子終止子之間。
③利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以 增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積,增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
④在檢驗(yàn)干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞時(shí),需要用到PCR技術(shù)。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、Taq酶Taq酶和 引物引物。
(2)利用蛋白質(zhì)工程對(duì)干擾素進(jìn)行改造,基本途徑是:預(yù)期蛋白質(zhì) 功能功能→設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì) 結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)→推測(cè)氨基酸 序列序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列(基因)。
(3)利用細(xì)胞工程生產(chǎn)干擾素,設(shè)計(jì)思路是:將相應(yīng)免疫細(xì)胞和瘤細(xì)胞融合,篩選出 雜交瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)可獲得大量干擾素。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】免疫;逆轉(zhuǎn)錄;限制;啟動(dòng)子;終止子;增大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積;Taq酶;引物;功能;結(jié)構(gòu);序列;雜交瘤細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:9引用:1難度:0.7
相似題
-
1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合,從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6~5倍,導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱??茖W(xué)家推測(cè),抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6 -
2.使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用??贵w一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合,實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細(xì)胞毒素)三部分組成,它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />
發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7 -
3.雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合,目前最常利用雜交瘤雜交法來(lái)制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)(免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù))生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題:
(1)與植物體細(xì)胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是
(2)對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞,還需進(jìn)行
(3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
(4)與直接使用長(zhǎng)春堿相比,將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥,對(duì)人體的副作用更小,原因是發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
相關(guān)試卷