人心肌細(xì)胞中的肌鈣蛋白由三個(gè)結(jié)構(gòu)不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和 肌鈣蛋白C(cTnC),其中肌鈣蛋白I(cTnI)在血液中含量上升是心肌損傷的特異指標(biāo)。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過(guò)程。
(1)細(xì)胞培養(yǎng)中,為防止有害代謝物的積累,可采用定期更換培養(yǎng)液定期更換培養(yǎng)液的方法。每隔2周用cTnI作為抗原注射小鼠一次,共注射三次,其目的是加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞,最后一次免疫后第3天,取脾臟內(nèi)部分組織制成細(xì)胞懸液與骨髓瘤細(xì)胞誘導(dǎo)融合,常用的誘導(dǎo)因素是滅活的病毒(PEG)滅活的病毒(PEG)。
(2)甲、乙、丙中,只含雜交瘤細(xì)胞的是乙和丙乙和丙,②過(guò)程表示將乙細(xì)胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進(jìn)行抗體陽(yáng)性檢測(cè),之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測(cè),并多次重復(fù)上述操作,其目的是篩選獲得能產(chǎn)生特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高的抗cTnI抗體的雜交瘤細(xì)胞。
(3)酶聯(lián)免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖:
據(jù)圖分析,固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體與同一抗原表面的不同部位不同部位結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化檢測(cè)底物反應(yīng)與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過(guò)測(cè)定產(chǎn)物量來(lái)判斷待測(cè)抗原量。
(4)研究人員獲得三種抗cTnI單克隆抗體,分別記為A、B、C.為檢測(cè)哪兩種單克隆抗體適合用于雙抗體夾心法,科研人員需要進(jìn)行66組實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】定期更換培養(yǎng)液;加強(qiáng)免疫,刺激小鼠機(jī)體產(chǎn)生更多的淋巴細(xì)胞;滅活的病毒(PEG);乙和丙;特異性強(qiáng)、靈敏度高;不同部位;與待測(cè)抗原結(jié)合,酶催化檢測(cè)底物反應(yīng);6
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:101引用:2難度:0.1
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1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過(guò)比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
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(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無(wú)關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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