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重組人胰島素是世界上第一個(gè)基因工程藥物,它的使用造福了億萬(wàn)糖尿病患者。興趣小組探究工程菌的構(gòu)建,實(shí)驗(yàn)所用質(zhì)粒載體如圖所示,其中LacZ基因的表達(dá)產(chǎn)物能將無(wú)色反應(yīng)物X-gal水解,從而使菌落呈藍(lán)色,否則菌落呈現(xiàn)白色;Ampr基因的表達(dá)產(chǎn)物分泌到細(xì)胞外發(fā)揮作用。本實(shí)驗(yàn)所用的受體大腸桿菌無(wú)LacZ基因。

(1)將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是:一般先用Ca2+處理細(xì)胞,使細(xì)胞處于
一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子
的生理狀態(tài),然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。
(2)雙重篩選培養(yǎng)基:培養(yǎng)基中加入
氨芐青霉素
氨芐青霉素
用以篩選出導(dǎo)入了質(zhì)粒載體的受體菌(轉(zhuǎn)化子),培養(yǎng)基中加入
X-gal
X-gal
用以鑒別出含重組質(zhì)粒的受體菌(重組子)。重組子的菌落顏色是
白色
白色
,原因是
重組子因LacZ基因被破壞,無(wú)法合成水解X-gal的酶,菌落呈白色
重組子因LacZ基因被破壞,無(wú)法合成水解X-gal的酶,菌落呈白色
。
(3)長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)后,培養(yǎng)基中轉(zhuǎn)化子形成的菌落周?chē)霈F(xiàn)了一些非轉(zhuǎn)化子形成的較小菌落,這些非轉(zhuǎn)化子菌落形成的原因是
培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),Ampr基因(抗性基因)的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累,使周?chē)囵B(yǎng)基氨芐青霉素失效
培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),Ampr基因(抗性基因)的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累,使周?chē)囵B(yǎng)基氨芐青霉素失效
。

【答案】一種能吸收周?chē)h(huán)境中DNA分子;氨芐青霉素;X-gal;白色;重組子因LacZ基因被破壞,無(wú)法合成水解X-gal的酶,菌落呈白色;培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),Ampr基因(抗性基因)的表達(dá)產(chǎn)物分泌積累,使周?chē)囵B(yǎng)基氨芐青霉素失效
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/5/28 8:0:9組卷:0引用:2難度:0.5
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是(  )

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí),解開(kāi)DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶,常見(jiàn)的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒(méi)有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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