某一質(zhì)粒載體如圖所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中會導(dǎo)致相應(yīng)的基因失活（Ampr表示氨芐青霉素抗性基因，Tetr表示四環(huán)素抗性基因）。有人將此質(zhì)粒載體用BamHⅠ酶切后，與用BamHⅠ酶切獲得的目的基因混合，加入DNA連接酶進(jìn)行連接反應(yīng)，用得到的混合物直接轉(zhuǎn)化大腸桿菌，結(jié)果大腸桿菌有的未被轉(zhuǎn)化，有的被轉(zhuǎn)化。被轉(zhuǎn)化的大腸桿菌有三種，分別是含有環(huán)狀目的基因、含有質(zhì)粒載體、含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌?；卮鹣铝袉栴}：
（1）質(zhì)粒載體作為基因工程的工具，應(yīng)具備的基本條件有 能自我復(fù)制能自我復(fù)制、具有標(biāo)記基因（有一個或多個限制酶切割位點）具有標(biāo)記基因（有一個或多個限制酶切割位點）（答出兩點即可）。而作為基因表達(dá)載體，除滿足上述基本條件外，還需具有啟動子和終止子。
（2）如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選，在上述四種大腸桿菌細(xì)胞中，未被轉(zhuǎn)化的和僅含有環(huán)狀目的基因的細(xì)胞是不能區(qū)分的，其原因是①二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長；并且②含有質(zhì)粒載體含有質(zhì)粒載體和③含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的細(xì)胞也是不能區(qū)分的，其原因是④二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長。在上述篩選的基礎(chǔ)上，若要篩選含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的單菌落，還需使用⑤含有四環(huán)素含有四環(huán)素的固體培養(yǎng)基。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】能自我復(fù)制；具有標(biāo)記基因（有一個或多個限制酶切割位點）；二者均不含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均不生長；含有質(zhì)粒載體；含有插入了目的基因的重組質(zhì)粒；二者均含有氨芐青霉素抗性基因，在該培養(yǎng)基上均能生長；含有四環(huán)素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：13引用：1難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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