人血清白蛋白（HSA）在臨床上的需求量大，由于其來源有限和有生物污染的風(fēng)險(xiǎn)，重組人血清白蛋白（rHSA）成為其重要的替代品?？蒲腥藛T將HSA基因轉(zhuǎn)入酵母菌細(xì)胞，獲得了重組人血清白蛋白。如圖為酵母菌基因改造以及工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)rHSA的過程示意圖，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ是四種不同的限制酶，其各自識(shí)別的酶切位點(diǎn)如下表所示?；卮鹣铝袉栴}：
| 限制酶 | Ⅰ | Ⅱ | Ⅲ | Ⅳ |
| 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) |
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使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸
。利用酵母菌細(xì)胞生產(chǎn)rHSA的過程利用了 基因重組
基因重組
的生物學(xué)原理。（2）構(gòu)建的基因表達(dá)載體中需要使用酵母菌蛋白基因的啟動(dòng)子AOX，原因是
AOX有利于HSA基因在酵母菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)
AOX有利于HSA基因在酵母菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)
。將受體酵母菌置于含有 四環(huán)素
四環(huán)素
的培養(yǎng)基中進(jìn)行篩選培養(yǎng)，以獲得能表達(dá)HSA的細(xì)胞。（3）圖中啟動(dòng)子處存在RNA聚合酶結(jié)合位點(diǎn)序列，推測(cè)該序列的作用是
調(diào)控HSA基因的轉(zhuǎn)錄
調(diào)控HSA基因的轉(zhuǎn)錄
?？蒲腥藛T將HSA基因插入質(zhì)粒中時(shí)，最好選擇限制酶 Ⅱ、Ⅳ
Ⅱ、Ⅳ
進(jìn)行共同切割，原因是 質(zhì)粒上沒有限制酶Ⅲ的識(shí)別位點(diǎn)；使用限制酶Ⅰ會(huì)使質(zhì)粒的啟動(dòng)子丟失或標(biāo)記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質(zhì)粒反向連接
質(zhì)粒上沒有限制酶Ⅲ的識(shí)別位點(diǎn)；使用限制酶Ⅰ會(huì)使質(zhì)粒的啟動(dòng)子丟失或標(biāo)記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質(zhì)粒反向連接
（答出2點(diǎn)即可）。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；基因重組；AOX有利于HSA基因在酵母菌細(xì)胞內(nèi)表達(dá)；四環(huán)素；調(diào)控HSA基因的轉(zhuǎn)錄；Ⅱ、Ⅳ；質(zhì)粒上沒有限制酶Ⅲ的識(shí)別位點(diǎn)；使用限制酶Ⅰ會(huì)使質(zhì)粒的啟動(dòng)子丟失或標(biāo)記基因被破壞；使用兩種不同的限制酶可以避免目的基因和質(zhì)粒反向連接
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：27引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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