大腸桿菌是水體中常見的微生物,經(jīng)改造的大腸桿菌可用來檢測制藥廠排出的污水中某化合物X(一種遺傳毒性雜質(zhì),可損傷細胞DNA,具有致癌可能)的含量。回答下列問題:
(1)大腸桿菌在含有伊紅—亞甲藍的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中生長,菌落呈深紫色并有金屬光澤;據(jù)此可用于檢測污染水體中大腸桿菌的數(shù)量。上述培養(yǎng)基是否屬于選擇培養(yǎng)基?說明理由。 不屬于,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖,不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長不屬于,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖,不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長
(2)圖1中甲、乙、丙、丁是從微生物中分離到的可被化合物X激活的4種毒性響應(yīng)基因啟動子(箭頭表示轉(zhuǎn)錄方向);圖2質(zhì)粒中SRR基因的表達產(chǎn)物可使大腸桿菌等細菌裂解。將4種啟動子分別插入質(zhì)粒的P區(qū),以構(gòu)建表達載體,導(dǎo)入大腸桿菌可獲得對化合物X敏感的工程菌。
①圖2質(zhì)粒中的P區(qū)能被細胞中 RNA聚合RNA聚合酶識別并結(jié)合,以實現(xiàn)SRR基因的表達。
②為使4種啟動子正確插入到質(zhì)粒上,利用PCR技術(shù)擴增啟動子時,需分別在4種啟動子A端和B端添加限制酶 XhoⅠXhoⅠ和 SapⅠSapⅠ的酶切位點。
③為初步檢測表達載體是否構(gòu)建成功,可用上述兩種限制酶對質(zhì)粒和4種表達載體進行切割,然后對酶切產(chǎn)物進行凝膠電泳,檢測結(jié)果如圖3所示。由此可初步判定表達載體的構(gòu)建 成功成功(填“成功”或“不成功”)
④作為受體細胞的大腸桿菌需要 CC。
A.DNA具有限制酶的酶切位點
B.能抗氨芐青霉素
C.能在含化合物X的培養(yǎng)液中生長
(3)將獲得的工程菌甲、乙、丙、丁和對照菌分別培養(yǎng)在細菌培養(yǎng)液中,2小時后在培養(yǎng)液中加入化合物X繼續(xù)培養(yǎng),檢測細菌的密度,結(jié)果如圖4所示。
①實驗中的對照菌是 導(dǎo)入空載質(zhì)粒的大腸桿菌導(dǎo)入空載質(zhì)粒的大腸桿菌。
②實驗中對細菌密度的統(tǒng)計方法應(yīng)為 AA。
A.稀釋涂布平板法
B.利用細菌計數(shù)板在顯微鏡下直接計數(shù)
C.A或B均可
③據(jù)圖可知,4種工程菌均啟動了對化合物X的響應(yīng),判斷的依據(jù)是 在加入化合物X前,4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異,加入化合物X后,4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌在加入化合物X前,4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異,加入化合物X后,4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌。
【答案】不屬于,在牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中很多細菌能正常生長繁殖,不能抑制或阻止除大腸桿菌之外的其他微生物的生長;RNA聚合;XhoⅠ;SapⅠ;成功;C;導(dǎo)入空載質(zhì)粒的大腸桿菌;A;在加入化合物X前,4種工程菌的生長情況與對照菌無明顯差異,加入化合物X后,4種工程菌的菌體密度顯著低于對照菌
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/21 8:0:10組卷:17引用:2難度:0.6
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