EPO是促紅細(xì)胞生成素的英文簡(jiǎn)稱，是一種激素樣物質(zhì)，可促進(jìn)體內(nèi)新紅細(xì)胞生成。人類已可通過(guò)基因工程合成EPO基因，并采用中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢（CHO）細(xì)胞表達(dá)系統(tǒng)來(lái)獲取產(chǎn)物，其過(guò)程如圖。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）從人體組織中提取EPO的mRNA，在 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶的作用下合成EPO基因的cDNA，再通過(guò)PCR技術(shù)獲得大量EPO基因，PCR的產(chǎn)物一般通過(guò) 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳來(lái)鑒定。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)需先加熱至90?95℃，后冷卻至55?60℃，以上調(diào)控溫度操作的目的分別是 使DNA雙鏈打開(kāi)解為單鏈使DNA雙鏈打開(kāi)解為單鏈、使兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合使兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合。
（2）供體母鼠通常情況下每次排卵8?12枚，為使其超數(shù)排卵，需注射 促性腺促性腺 激素以排出更多的卵子，培養(yǎng)到 MⅡ中MⅡ中 期與獲能的精子相遇，精子穿越透明帶，完成體外受精。
（3）①過(guò)程構(gòu)建了基因表達(dá)載體，內(nèi)部包括不可缺少的組成部分，其中 啟動(dòng)子啟動(dòng)子 能驅(qū)動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄。切割含EPO基因的DNA與載體時(shí)通常用兩種不同限制酶的原因是 防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接。
（4）采用 顯微注射顯微注射 技術(shù)，將重組表達(dá)載體導(dǎo)入小鼠受精卵中，將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)。當(dāng)胚胎發(fā)育至 桑葚胚或囊胚桑葚胚或囊胚 時(shí)期，向受體移植。
（5）若想檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因倉(cāng)鼠是否成功表達(dá)EPO，可以采用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交 技術(shù)對(duì)血液來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合；體外受精和胚胎移植．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；瓊脂糖凝膠電泳；使DNA雙鏈打開(kāi)解為單鏈；使兩種引物通過(guò)堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條單鏈DNA結(jié)合；促性腺；MⅡ中；啟動(dòng)子；防止質(zhì)粒和目的基因自身環(huán)化和反向連接；顯微注射；桑葚胚或囊胚；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/8 8:0:9組卷：98引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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