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人肌紅蛋白(Myo)是早期診斷急性心肌梗塞的生化標(biāo)志物之一。為制備抗Myo的單克隆抗體,科研人員進(jìn)行研究。
(1)科研人員以Myo作為
抗原
抗原
免疫小鼠,取小鼠的脾臟細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞細(xì)胞誘導(dǎo)融合,首先用
選擇培養(yǎng)基
選擇培養(yǎng)基
篩選得到雜交瘤細(xì)胞,該細(xì)胞的特點(diǎn)是
既能無限增殖,又能產(chǎn)生抗體
既能無限增殖,又能產(chǎn)生抗體

(2)雜交瘤細(xì)胞再經(jīng)過克隆化培養(yǎng)和
專一抗體檢測(cè)
專一抗體檢測(cè)
才能篩選得到符合要求的雜交瘤細(xì)胞。雜交瘤細(xì)胞可采用注射到小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)或進(jìn)行
體外
體外
培養(yǎng)的方式進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)。體外培養(yǎng)時(shí),首先應(yīng)保證其處于
無菌無毒
無菌無毒
的環(huán)境,除了適宜的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、溫度等條件外,還需要控制氣體條件是
95%空氣
95%空氣
與5%二氧化碳的混合氣體,二氧化碳的主要作用是
維持培養(yǎng)液的pH值
維持培養(yǎng)液的pH值
。在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入
血清
血清
。
(3)雙抗體夾心法是醫(yī)學(xué)上常用的定量檢測(cè)抗原的方法,具體原理如圖:
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固相抗體和酶標(biāo)抗體均能與抗原結(jié)合,這是由于不同抗體與同一抗原表面的
不同部位
不同部位
結(jié)合。該檢測(cè)方法中,酶標(biāo)抗體的作用是
與待測(cè)抗原結(jié)合;酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過測(cè)定酶反應(yīng)產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量
與待測(cè)抗原結(jié)合;酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過測(cè)定酶反應(yīng)產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量
。
(4)研究人員獲得三種抗Myo單克隆抗體,分別記為A、B、C。為檢測(cè)它們之中哪兩種適合用于雙抗體夾心法,科研人員需要進(jìn)行
6
6
組實(shí)驗(yàn),檢測(cè)并比較各組實(shí)驗(yàn)的
產(chǎn)物量
產(chǎn)物量
。

【答案】抗原;選擇培養(yǎng)基;既能無限增殖,又能產(chǎn)生抗體;專一抗體檢測(cè);體外;無菌無毒;95%空氣;維持培養(yǎng)液的pH值;血清;不同部位;與待測(cè)抗原結(jié)合;酶催化檢測(cè)底物反應(yīng),可通過測(cè)定酶反應(yīng)產(chǎn)物量來判斷待測(cè)抗原量;6;產(chǎn)物量
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/11 8:0:9組卷:17引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.為實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點(diǎn),制備相應(yīng)單克隆抗體并構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物。
    (1)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的CLDN6蛋白能夠促進(jìn)腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點(diǎn)。CLDN6蛋白是一個(gè)跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內(nèi)區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時(shí),應(yīng)提取
     
    區(qū)基因序列用于設(shè)計(jì)抗原。
    (2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內(nèi),從該小鼠脾臟中獲取
     
    細(xì)胞,誘導(dǎo)其與骨髓瘤細(xì)胞融合,利用
     
    篩選得到雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體陽性檢測(cè),多次篩選得到產(chǎn)生單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,最終通過體內(nèi)或體外培養(yǎng)獲得大量單克隆抗體。
    (3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結(jié)合構(gòu)建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關(guān)抗體-DMI)分別處理高表達(dá)CLDN6細(xì)胞和低表達(dá)CLDN6細(xì)胞,檢測(cè)細(xì)胞活力,結(jié)果如圖1:
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    由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞,依據(jù)是
     
    。
    (4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機(jī)制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達(dá)CLDN6細(xì)胞的原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6
  • 2.2020年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予發(fā)現(xiàn)丙肝病毒的三位科學(xué)家。丙肝病毒引起的丙型肝炎可導(dǎo)致肝臟慢性炎癥壞死和纖維化,部分患者可發(fā)展為肝硬化甚至肝癌。如圖為利用小鼠甲為實(shí)驗(yàn)材料研制丙肝病毒的單克隆抗體的實(shí)驗(yàn)流程。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
  • 3.為減少鼠源單克隆抗體可能引起的副作用,某研究團(tuán)隊(duì)對(duì)鼠源單克隆抗體F進(jìn)行改造,制備了人—鼠嵌合抗體F′,具體流程為:提取鼠源雜交瘤細(xì)胞RNA,逆轉(zhuǎn)錄后通過PCR擴(kuò)增抗體F的基因序列,將其部分序列用人的相應(yīng)抗體基因序列進(jìn)行替換,再構(gòu)建表達(dá)載體,在體外制備人﹣鼠嵌合抗體F′。為檢測(cè)抗體性質(zhì),他們測(cè)定了F′單獨(dú)與抗原作用時(shí)對(duì)抗原的結(jié)合能力以及F′和F同時(shí)與抗原作用(F′與F初始濃度相同)時(shí)F′對(duì)抗原的結(jié)合能力,結(jié)果如下圖所示。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5
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